快速视觉检测高利用效率基因OsGRF4在米 (Oryza sativa L.) 使用循环介导同热放大方法
Yonghang Tian1,2, Wenwei Ye3, Xiangshuai Liang1
1College of Food Science and Engineering, Hainan Tropical Ocean University, No. 1 Yucai Road, Sanya 572022, China.
Genes
|October 28, 2023
概括
使用循环介导同热放大 (LAMP) 的新视觉检测方法准确地识别了大米中的高利用效率 (NUE) 基因OsGRF4NM73. 这简化了现场检测,用于开发改进的米品种.
科学领域:
- 农业科学 农业科学
- 分子生物学分子生物学
- 遗传学 是一个遗传学.
背景情况:
- 调节生长因子4 (OsGRF4) 的等位基因对开发具有高利用效率 (NUE) 的大米至关重要,减少了肥料需求.
- 目前的检测方法如PCR是复杂的,需要专门的实验室设置.
- 快速地在现场检测OsGRF4的方法对于推进研究和实际应用至关重要.
研究的目的:
- 为高NUE基因OsGRF4NM73.3开发一种方便快速的视觉检测方法.
- 为此目的,利用分离放大多态序列 (CAP) 和循环介导同热放大 (LAMP).
- 为了确定在1187-1188 bp的特定TC→AA突变作为OsGRF4NM73检测的目标.
主要方法:
- 采用了分裂放大多态序列 (CAPs) 和循环介导同热放大 (LAMP).
- 优化LAMP反应条件在65°C60分钟使用氨蓝 (HNB) 作为颜色指示器.
- 在10种大米品种上测试了该方法,以确定OsGRF4NM73等位基因的存在.
主要成果:
- 成功开发了OsGRF4NM73等位基因的视觉检测方法.
- 在10种测试品种中,确定NM73米系具有目标OsGRF4NM73等位基因.
- 在LAMP试验中通过从紫色到天蓝色的颜色变化确认了OsGRF4NM73等位基因的存在.
结论:
- 开发的LAMP方法提供了一种方便而准确的方法来检测米中的OsGRF4NM73基因.
- 这种方法有助于选择具有高利用效率 (NUE) 的品种.
- 这些发现支持推进可持续农业的育种计划.
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