一个基于膜的NitroPure酸纤维素葡萄藤病毒采样套件:开发和部署来调查日本的葡萄园和苗圃
Mizuho Nita1,2, Taylor Jones1, Diana McHenry1
1Alson H. Smith Jr. Agricultural Research and Extension Center, Virginia Polytechnic Institute and State University (Virginia Tech), Winchester, VA 22602, USA.
Viruses
|October 28, 2023
概括
一种新的NitroPure Nitrocellulose膜方法可以有效地采样和储存葡萄汁以检测病毒. 这项技术成功地发现了多种葡萄藤病毒,在日本葡萄园中葡萄藤叶卷相关病毒3的流行率很高.
科学领域:
- 植物病理学 植物病理学
- 分子生物学分子生物学
- 农业科学 农业科学
背景情况:
- 葡萄藤病毒对全世界的葡萄种植构成重大威胁.
- 准确和高效的检测方法对于疾病管理至关重要.
- 目前的葡萄汁采样和储存方法可能具有挑战性.
研究的目的:
- 开发和验证一种基于膜的新NitroPure酸纤维素 (NPN) 方法,用于采样和储存葡萄汁.
- 评估从NPN膜中提取核酸的效率,以检测葡萄藤病毒.
- 通过使用开发的套件,调查日本葡萄园中特定葡萄藤病毒的流行情况.
主要方法:
- 开发一种基于NPN膜的葡萄汁采样和储存方法.
- 从NPN膜中提取核酸的优化.
- 验证了检测葡萄树叶卷相关病毒2 (GLRaV2),GLRaV3,葡萄树茎插孔相关病毒 (GRSPaV),葡萄树病毒A,葡萄树病毒B和葡萄树红斑病毒 (GRBV) 的方法.
- 实地测试和日本葡萄园的邮寄调查使用开发的采样套件.
主要成果:
- 从NPN膜中获得多个葡萄藤病毒的100%放大成功.
- 在室温下证明可回收核酸的稳定存储18个月.
- 在采样的日本葡萄中确定了GLRaV3 (48.5%) 的大量流行.
- 检测到GLRaV2的低流行率 (3%) 和没有检测到GRBV.
结论:
- 膜NPN方法提供了一种高效可靠的方法,用于葡萄藤果汁采样和病毒检测.
- 开发的采样套件对于葡萄园中葡萄藤病毒的大规模调查是有效的.
- 在调查的日本葡萄园中,GLRaV3 是一种普遍存在的病毒,这凸显了需要管理策略的需要.
