在活老鼠精子中实时成像体内动力学和外细胞分裂的实时成像
Roy Cohen1, Danielle M Sosnicki2, Melissa A White2
1Baker Institute for Animal Health, College of Veterinary Medicine, Cornell University; Department of Public and Ecosystem Health, College of Veterinary Medicine, Cornell University; roy.cohen@cornell.edu.
Journal of visualized experiments : JoVE
|October 30, 2023
概括
研究人员开发了一种新的方法来观察精子宏体内的动态在宏体外细胞化 (AE) 过程中,这是受精的关键步骤. 这种技术为信号如何调节精子功能和受精提供了新的见解.
科学领域:
- 生殖生物学 生殖生物学
- 细胞生物学 细胞生物学
- 生物化学 生物化学
背景情况:
- 体外细胞分裂 (AE) 对于受精至关重要,它涉及精子囊泡与血膜的融合.
- 信号在调节AE及其中间步骤中的确切作用仍然不完全理解.
- 现有的方法缺乏空间和时间分辨率,以检测体内体动态.
研究的目的:
- 引入一种新的实时,空间分辨率监测宏体动态的新方法.
- 为了研究AE期间体内的波动和膜融合事件之间的关系.
- 为剖析控制精子容量和受精的信号通路提供一种工具.
主要方法:
- 开发一种转基因小鼠模型,表达出细胞瘤向传感器 (AcroSensE).
- AcroSensE将一个基因编码的指标 (GCaMP) 与mCherry相结合,用于同时观察和融合.
- 利用高率成像和单个精子向刺激剂的实时监测.
主要成果:
- 在活体精子中同时观察了宏体动态和AE.
- 提供了量化和分析信号和聚变数据的协议.
- 确定了AcroSensE模型与CRISPR等遗传工具的兼容性,以便进一步研究.
结论:
- 该AcroSensE方法提供了一种强大而有效的工具,用于研究精子基体中的亚细胞动态.
- 这种方法增强了对如何调节受精期间的膜融合和外细胞形成的理解.
- 促进对影响精子功能和生育能力的额外信号通路的未来研究.
