在质母细胞瘤患者的血CD63-EV中检测EGFR及其活性状态:使用阳离子交换膜传感器快速分析
bioRxiv : the preprint server for biology
|October 31, 2023
概括
我们开发了一种新型检测方法来检测CD63细胞外囊泡 (EVs) 和EGFR,提供一种快速,敏感和无光体的方法来直接从患者血中检测质母细胞瘤.
科学领域:
- 生物医学诊断 生物医学诊断
- 纳米技术 纳米技术
- 细胞外囊泡研究研究
背景情况:
- 目前的细胞外囊泡 (EV) 诊断方法缺乏敏感性和选择性.
- 质母细胞瘤需要改进的非侵入性早期检测和监测策略.
- 针对EGFR等特定的EV表面蛋白对于癌症诊断至关重要.
研究的目的:
- 为CD63 EV及其表面载荷,EGFR.开发一种新的,定量和无化物免疫试验.
- 为了实现对EV的总和活性EGFR的敏感和选择性检测,用于质母细胞瘤诊断.
- 通过直接血分析,为现有的基于电动汽车的诊断方法提供快速而强大的替代方案.
主要方法:
- 利用带有水友性离子交换膜和充电的二氧化纳米粒子记者的电荷关策略.
- 通过膜的离子耗尽作用提高了测试灵敏度和稳定性.
- 采用单克隆抗体 (mAb806) 来检测EVs上活性EGFR变异的特定表位.
主要成果:
- 实现了30 EVs/μL的检测极限和0.01%的蛋白质亚分数的相对灵敏度.
- 通过使用通用规范校准,证明了CD63 EVs与局部EGFR的准确量化.
- 在未经治疗的患者样本中成功检测出质母细胞瘤,AUC为0.99和p值为0.000033.
结论:
- 这种新型免疫试验提供了一种灵敏,选择性和快速的方法来量化CD63 EVs和EGFR活性.
- 这种测定方法可以从患者血中直接检测质母细胞瘤,超过目前的诊断性能.
- 这种无光体的电荷隔离方法最大限度地减少干扰,为改进的非侵入性癌症诊断铺平了道路.
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