一种针对SAM依赖的甲基转移酶的通用,连续的检测方法
Marian J Menke1, Pascal Schneider2, Christoffel P S Badenhorst1
1Department of Biotechnology and Enzyme Catalysis, Institute of Biochemistry, University of Greifswald, Felix-Hausdorff-Str. 4, 17487, Greifswald, Germany.
Angewandte Chemie (International ed. in English)
|November 2, 2023
概括
我们开发了一种高通量试验,用于选S-adenosyl-l-methionine依赖甲基转移酶 (MTs). 这种酶测定能够有效地识别甲基转移酶,用于药物发现和开发.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 酶学 是一种酶学.
- 药物发现 药物发现 药物发现
背景情况:
- 酶催化后期功能化 (LSF) 提供了一条通往强效活性药物成分 (API) 的途径.
- 依赖S-adenosyl-l-methionine的甲基转移酶 (MTs) 进行选择性甲基化,超越了传统的化学方法.
- 识别合适的MT对于推进API开发至关重要.
研究的目的:
- 开发一种基于持续光的高通量试验,用于选SAM-依赖的甲基转移酶.
- 为了能够有效地识别和表征甲基转移酶,用于制药应用.
主要方法:
- 一种新的两步酶定量测试被设计为S-adenosyl-l-homocysteine转化为H2S.
- 使用阿齐多库马林硫化物探针实现了选择性光读取.
- 该试验使用表达O-MTs和N-MTs的大肠杆菌细胞溶解物进行了验证.
主要成果:
- 开发的试验成功确定了E. coli细胞溶解物中的甲基转移酶活性.
- 该试验证明了SAM依赖甲基转移酶的高通量选的适用性.
- 研究了两个O-MT和一个N-MT,证实了测试性能.
结论:
- 基于光的测定方法有效地识别和表征甲基转移酶.
- 这种高通量方法通过LSF促进了新API的发现.
- 该试验通过利用酶性甲基化来支持开发更强效的候选药物.
