高吞吐量选用于快速和可靠的预测单价抗体结合行为在流通模式
Julius Klemens Lorek1, Hanne Sophie Karkov1, Finn Matthiesen1
1Purification Technologies, Novo Nordisk A/S, Maaloev, Denmark.
Biotechnology and bioengineering
|November 6, 2023
概括
高吞吐量查 (HTS) 快速预测单克隆抗体 (mAbs) 的通过流 (FT) 离子交换 (AEX) 染色学行为. 表面性能分析和HTS数据加速了mAb净化下游工艺开发.
科学领域:
- 生物制药工艺开发 生物制药过程开发
- 染色学净化 染色学净化
- 蛋白质生物化学 蛋白质生物化学
背景情况:
- 流通式 (FT) 离子交换 (AEX) 染色体是单克隆抗体 (mAb) 净化的一个关键抛光步骤.
- 加速下游工艺开发对于高效的生物制药制造至关重要.
- 高吞吐量选 (HTS) 提供了一种有希望的方法来加快流程优化.
研究的目的:
- 为了研究单价mAbs (mvAbs) 的结合行为,使用HTS在AEX和混合模式树脂上的批量模式.
- 识别影响FT行为的关键因素,并预测最佳净化条件.
- 在更大的尺度上验证HTS衍生条件,用于mAb净化.
主要方法:
- 在批结合模式下执行HTS以评估各种AEX和混合模式树脂的mvAb分区系数 (Kp).
- 在分析中使用,绘制mvAbs.的充电和疏水表面斑块.
- 进行了1毫升的柱体实验,以验证HTS识别的最佳FT条件.
主要成果:
- HTS成功地将mvAbs分为强结合和弱结合/FT类别,独立于理论上的同电点.
- 充电和疏水斑块的分布与FT行为有显著的相关性.
- 在优化的FT条件 (7-9 mS/cm,pH 7.0) 中,在小型试验规模上实现了99%的产量和实质性的宿主细胞蛋白 (HCP) 减少 (<100 ppm).
结论:
- HTS是一种有效的工具,可以快速预测mvAbs.的FT AEX染色学性能.
- 在表面特性分析有助于理解和预测mvAb结合行为.
- 这种基于HTS的方法加速了早期的mAb候选人的下游流程开发.
