人类外周血液单核细胞的冷保存和生物能量评估

科学领域:

• 细胞生物学 细胞生物学
• 线粒体生理学线粒体生理学
• 代谢健康 代谢健康

背景情况:

• 线粒体对于真核细胞的能量生产至关重要;功能障碍与代谢疾病和衰老有关.
• 氧化酸化对于维持细胞能量恒温至关重要.
• 周围血液单核细胞 (PBMCs) 提供了一种最小侵入性的方法来评估线粒体功能并反映疾病状态.

研究的目的:

• 建立和验证用于分离和冷保存人类PBMCs用于线粒体生物能分析的方法.
• 为了确保冷保存和新鲜PBMC之间的线粒体功能参数的可比性.
• 为了促进标准化样本采集和测量在多中心临床研究.

主要方法:

• 从小量的 (8-24毫升) 人类血液中分离PBMCs的协议的开发.
• 为分离的PBMCs实施冷保存程序.
• 在新鲜和冷保存的PBMC之间对细胞数量,活力,腺三酸盐 (ATP) 水平和呼吸链活性进行比较分析.

主要成果:

• 与新鲜细胞相比,冷保存的PBMC仅在细胞数量和活力方面表现出微小的差异.
• 在新鲜和冷保存的PBMC之间,腺三酸盐 (ATP) 水平和呼吸链活性在很大程度上保持了可比性.
• 该协议允许在多个临床场所收集的样本进行现场生物能测定.

结论:

• 描述的PBMC隔离和冷保存方法有效地保护了线粒体的生物能量功能.
• 这种方法允许对线粒体功能进行一致和可靠的测量,克服了样本时间和位置的限制.
• 经过验证的PBMCs冷保存适用于调查代谢健康和疾病的大规模多中心临床研究.