用光DNA染料对预植入小鼠胚胎进行细胞计数技术.
Virginia E Papaioannou1, Richard R Behringer2
1Department of Genetics and Development, Columbia University Medical Center, New York, New York 10032, USA vep1@columbia.edu.
Cold Spring Harbor protocols
|November 6, 2023
概括
在早期胚胎中精确计数细胞是 morula 紧缩后的挑战. 本研究介绍了使用光DNA染料在植入前胚胎中精确核计数的协议,使得 trofhectoderm 和内部细胞质量 (ICM) 的差异化.
科学领域:
- 发展生物学 发展生物学
- 胚胎学 胚胎学
- 细胞生物学 细胞生物学
背景情况:
- 在植入前胚胎中精确的细胞计数对于发育研究至关重要.
- 由于活体胚胎的细胞边界模糊,光显微镜在毛囊缩后对细胞计数具有挑战性.
研究的目的:
- 提供可靠的协议来量化植入前胚胎中的细胞数量.
- 克服胚胎发育早期形态评估的局限性.
主要方法:
- 使用光DNA染料 (Hoechst,化) 进行核染色.
- 使用单个DNA染料实现简单核核计数协议.
- 详细介绍使用免疫外科手术和两种DNA染料对托菲克托皮和内部细胞质量 (ICM) 的差异核计数方法.
主要成果:
- 证明了光DNA染料在植入前胚胎中精确细胞计数方面的有效性.
- 建立了一种方法来区分和计数 trofhectoderm 和 ICM 的核.
结论:
- 基于光DNA染料的核计数为胚胎细胞数量确定提供了形态评估的强有力的替代方案.
- 描述的协议有助于精确量化胚胎发育中的细胞群.
