开发简单,快速和灵敏的方法,从全血中检测C型肝炎病毒RNA,使用反转录循环介导的同热放大
Matthew D Pauly1, Sabrina Weis-Torres1, Tonya M Hayden1
1Division of Viral Hepatitis, National Center for HIV, Hepatitis, STD, and TB Prevention, Centers for Disease Control and Prevention , USA, Atlanta, Georgia.
Journal of clinical microbiology
|November 7, 2023
概括
针对型肝炎病毒 (HCV) RNA检测的新简单工作流提供了快速,廉价的临床诊断. 珠子工作流显示了在实验室外诊断当前HCV感染的最高灵敏度.
科学领域:
- 肝炎C病毒 (HCV) 诊断的诊断方法
- 关心点的分子测定.
- 病毒RNA提取方法
背景情况:
- 型肝炎病毒 (HCV) 感染是一个重要的全球健康问题,往往被诊断不足.
- 目前的HCVRNA检测依赖于复杂的实验室测试,限制了可访问性.
- 简单,快速和廉价的诊断方法对于及时启动治疗至关重要.
研究的目的:
- 开发和评估从全血中提取型肝炎病毒 (HCV) RNA的简单工作流程.
- 评估这些工作流程与敏感的泛基因型逆转录循环介导同热放大 (RT-LAMP) 试验的兼容性.
- 为了确定 point-of-care HCV RNA检测的可行性.
主要方法:
- 开发了三种不同的工作流程 (水,热,珠) 来从小量的全血中提取HCV RNA.
- 这些工作流程与敏感的RT-LAMP测定用于HCV RNA检测相结合.
- 通过使用尖端全血样本来评估性能,并确定检测极限和检测率.
主要成果:
- 珠子工作流显示了最低的检测极限 (2.8 log10 IU/mL) 和最高的检测率 (94%).
- 水和热工作流的检测极限分别为4.3和4.2 log10 IU/mL,检测率为69%和75%.
- 所有的工作流都是快速的 (不到60分钟),兼容视觉检测,使用最小的设备.
结论:
- 开发的工作流提供了简单,快速和经济高效的方法来提取HCV RNA.
- 珠子工作流程对敏感的C型肝炎病毒感染的临床诊断非常有希望.
- 进一步简化可以使这些工作流程在诊断HCV时得到广泛使用.
