在胚胎干细胞神经分化过程中,PRC1亚单元RYBP和YAF2的功能剖析
Yanjiang Liu1,2,3, Gongcheng Hu2, Shengxiong Yang1,2
1State Key Laboratory of Respiratory Disease, The First Affiliated Hospital of Guangzhou Medical University, Joint School of Life Sciences, Guangzhou Institutes of Biomedicine and Health, Chinese Academy of Sciences, Guangzhou Medical University, Guangzhou, China.
多镇压复合体1 (PRC1) 有两种形式. 变异PRC1 (vPRC1) 中的RYBP和YAF2蛋白在胚胎干细胞神经分化中具有不同的作用.
科学领域:
- 表观遗传学和基因调控
- 发展生物学 发展生物学
- 干细胞生物学 干细胞生物学
背景情况:
- 多镇压复合体1 (PRC1) 存在于正规 (cPRC1) 和变体 (vPRC1) 形式.
- 含有RYBP或YAF2的PRC1变体催化H2AK119ub,这对于基因沉默至关重要.
- 在vPRC1中,RYBP和YAF2的不同功能在很大程度上仍未被描述.
研究的目的:
- 研究RYBP和YAF2在小鼠胚胎干细胞 (mESC) 神经分化中的差异性作用.
- 阐明由RYBP和YAF2.2调节神经发育的基础分子机制.
主要方法:
- 在CRISPR-Cas9基因编辑中生成Rybp和Yaf2淘汰的mESC线.
- 定量实时PCR (qRT-PCR) 用于基因表达分析.
- 西部涂抹以评估蛋白质水平和H2AK119ub修改.
- 染色体免疫沉,然后进行测序 (ChIP-seq) 进行RYBP结合分析.
主要成果:
- 在mESC神经分化过程中,RYBP表达减少,而YAF2表达增加.
- Rybp淘汰损害了神经分化,激活了Wnt信号,并消除了非神经外皮基因的抑制.
- Yaf2淘汰赛促进了神经分化,改变了目标基因的RYBP结合和H2AK119ub丰富.
结论:
- 在mESC神经分化中,RYBP和YAF2表现出对立且不同的调节功能.
- RYBP充当抑制剂,而YAF2似乎调节RYBP活动并促进分化.
- 这些发现揭示了干细胞命运决定中的新型表观遗传控制层.
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