远红色光探测器MitoView 633用于动态线粒体膜潜力测量的表征
Patrick Ernst1, Seulhee Kim2, Zengqiao Yang3
1Department of Medicine, University of Alabama at Birmingham, Birmingham, AL, United States.
Frontiers in physiology
|November 8, 2023
概括
MitoView 633是一种新型的深红色染料,可以有效地可视化活细胞中的线粒体膜潜力 (DYm). 它为多参数活细胞成像提供了卓越的光稳定性和兼容性.
科学领域:
- 细胞生物学 细胞生物学
- 生物物理学的生物物理.
- 生物化学 生物化学
背景情况:
- 线粒体膜潜力 (DYm) 对细胞生物能学至关重要.
- 在活细胞中精确测量DYm对于理解线粒体功能至关重要.
- 现有的DYm指标在光稳定性和多重复合能力方面存在局限性.
研究的目的:
- 描述MitoView 633用于活细胞成像的光谱特性和性能.
- 为了评估MitoView 633的线粒体定位,光漂白电阻和DYm变化期间的动态.
- 评估MitoView 633与其他用于多参数分析的光探针的兼容性.
主要方法:
- 使用共聚焦显微镜分析了MitoView 633的光谱特性和线粒体定位.
- 使用标准协议评估光漂白电阻和DYm脱极化动态.
- 在心肌细胞中使用MitoSOX Red和Fluo-4 AM进行了同时染色的实验.
主要成果:
- MitoView 633在远红色光谱 (660 ± 50 nm) 中发射,具有高热稳定性.
- 它特定地定位到线粒体,并表现出最小的光漂白.
- 它的光动态在DYm脱极化镜 TMRM,一个已知的指标.
- MitoView 633与MitoSOX Red和Fluo-4 AM兼容,可以同时监测DYm,ROS和Ca2+.
结论:
- MitoView 633是一种强大而通用的远红色光探针,用于评估活细胞中的线粒体膜潜力.
- 其卓越的光稳定性和多重复合能力使其非常适合先进的活细胞成像应用.
- 这种染料有助于对线粒体功能和细胞生物能学的全面分析.
