聚合菌actinomycetemcomitans的O-抗原WaAL结合酶的双重功能
David R Danforth1, Marcella Melloni1, Richard Thorpe1
1Department of Microbiology and Molecular Genetics, University of Vermont, Burlington, Vermont, USA.
在Aggregatibacter actinomycetemcomitans中的WaAL结合酶对于附着素A (EmaA) 的原结合活性至关重要. 在大肠杆菌中WaAL和EmaA的同时表达恢复了EmaA的EmaA.
科学领域:
- 微生物学 微生物学
- 分子生物学分子生物学
- 生物化学 生物化学
背景情况:
- 来自Aggregatibacter actinomycetemcomitans的粘合素A (EmaA) 对于原结合和四级结构至关重要.
- 假设EmaA的糖化,对其功能至关重要,由WaaL酶介导.
- 在格兰阴性细菌中,waaL通常将O-多糖化物 (O-PS) 与脂多糖化物 (LPS) 结合起来.
研究的目的:
- 调查WaWaL在EmaA糖化和原结合活性中的作用.
- 为了确定WaWaL的酶活性是否对于EmaA的细胞外基质相互作用是必要的.
- 为研究WaAL-EmaA相互作用建立一个异质表达系统.
主要方法:
- 使用了一种A. actinomycetemcomitans的突变菌株,并将其与E. coli ortholog (rflA) 补充.
- 在大肠杆菌中开发了一种双等离子体异构表达系统,用于共同表达A. actinomycetemcomitans waaL和emaA.
- 在各种表达条件下评估了EmaA的原结合活性和生化特性.
主要成果:
- 在A. actinomycetemcomitans的突变体中,大肠杆菌的正体并没有恢复原结合,但确实恢复了O-PS酶活性.
- 在大肠杆菌中,waAL或emaA的个体表达没有赋予原结合活性.
- 大肠杆菌中waAL和emaA的同时表达显著增加了EmaA的原结合,并改变了其生物化学特性.
结论:
- A. actinomycetemcomitans 的 WaaL 连接酶在 LPS 生物合成和 EmaA 糖化中起着双重作用.
- 对EmaA的原结合活性来说,直接需要WaAL结合酶活性.
- 这些发现支持了一个新的假设,即将LPS生物合成酶与细菌粘附机制联系起来.
更多相关视频
10:21Directed Protein Packaging within Outer Membrane Vesicles from Escherichia coli: Design, Production and Purification
Published on: November 16, 2016
08:04Quantitative Examination of Antibiotic Susceptibility of Neisseria gonorrhoeae Aggregates Using ATP-utilization Commercial Assays and Live/Dead Staining
Published on: February 8, 2019
相关概念视频
Formation of Lipopolysaccharides
Mechanism of Conjugation
Cytoskeletal Proteins in Bacteria
Actin Polymerization and Cell Motility
Actin cytoskeleton dynamics can produce pushing, pulling, and resistance forces that help the cell to migrate....
Adherens Junctions
Adherens Junctions are Dynamic
Antibody Actions
Neutralization
Antibodies can bind to pathogens, preventing them from infecting host cells. This process...
