使用光成像技术快速对Jurkat表达化学抗原受体进行体内细胞毒性评估
Siddharth Subham1, John D Jeppson2, Benjamin K Gibbs3
1Department of Radiation Oncology, University of Kansas Cancer Center; Department of Cancer Biology, University of Kansas Cancer Center; BioEngineering Program, University of Kansas.
Journal of visualized experiments : JoVE
|November 13, 2023
概括
这项研究引入了一个快速平台,用于评估链优化的仿真抗原受体 (CAR) T细胞结构. 新方法使用Jurkat细胞快速评估CAR设计,然后在初级T细胞中进行测试.
科学领域:
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 细胞工程 细胞工程
- 在瘤学瘤学.
背景情况:
- 化学抗原受体 (CAR) T 细胞代表了癌症治疗的重大进展.
- CAR结构设计,特别是对链内链接器和链域的修改,极大地影响了CAR介导的细胞毒性.
- 由于CAR T细胞生产的时间和资源密集度,CAR T细胞设计的广泛变化需要有效的评估方法.
研究的目的:
- 开发和介绍一个新的平台,用于快速评估链优化的CAR结构.
- 为了使各种CAR设计在进行广泛测试之前能够更快地进行选.
- 通过高效的构建评估,优化CAR T细胞疗法开发.
主要方法:
- 使用的Jurkat细胞 (CAR-J),一种能够进行高效的lentiviral转导的永生T细胞系.
- 开发了一种使用光成像仪快速评估CAR-J的协议.
- 在初始查后,在外围血液单核细胞 (PBMC) 衍生的T细胞中确认了细胞分解活性.
主要成果:
- 建立了一个高通量平台来评估CAR构造变化.
- 在Jurkat细胞中证明了高效的CAR转导和评估.
- 验证了平台能够识别有效的CAR设计以用于随后在初级T细胞中进行测试的能力.
结论:
- 描述的平台显著加快了对链优化的CAR结构的评估.
- 这种方法减少了CAR T细胞开发所需的时间和材料投资.
- CAR-J平台促进了快速查,为更快地优化CAR T细胞疗法铺平了道路.


