隔离和识别边缘细胞的细胞
Guanyu Su1, Wei Wang1, Lingjuan Xu1
1Department of Ophthalmology, Tongji Hospital, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology.
Journal of visualized experiments : JoVE
|November 13, 2023
概括
一种新的标准程序有效地从眼组织中分离和识别肢体细胞 (LNCs). 这些LNCs表现出高增殖率和表达关键干细胞标记物,为它们的广泛使用提供了可靠的基础.
科学领域:
- 眼科医生 眼科 眼科
- 干细胞生物学 干细胞生物学
- 细胞生物学 细胞生物学
背景情况:
- 边缘内细胞 (LNCs) 对于眼睛表面的维护和再生至关重要.
- 隔离和识别LNC的标准化方法对于研究和临床应用至关重要.
研究的目的:
- 建立和验证用于隔离和识别肢体细胞 (LNCs) 的标准程序.
- 描述孤立的LNCs的干细胞标志物表达特征.
主要方法:
- 皮质组织从眼中获取,并使用酶性消化 (原酶A,素-EDTA) 进行处理.
- 细胞在修饰胚胎干细胞介质 (MESCM) 中培养,在Matrigel涂层的表面上培养.
- 使用免疫光学,qPCR和流细胞计进行了LNC的鉴定和表征.
主要成果:
- 开发了一种可复制的方法来隔离和培养12个通道的LNC.
- 在通道4和6之间,LNC表现出高扩散活动.
- 与骨髓介质干细胞 (BMMSCs) 相比,LNCs表达的干细胞标记物 (例如CD73,CD90,CD105,SCF) 的水平显著更高.
- 维丁 (VIM),CD90,CD105和血小板衍生生长因子受体β (PDGFRβ) 被确定为LNC识别的可靠标记物.
结论:
- 开发的标准程序提供了一种可靠的方法来隔离和识别LNC.
- 标志性的LNCs具有显著的干细胞特性,使它们成为眼部再生医学的前景.
- 该协议可以促进LNC在实验室研究和潜在的治疗策略中的更广泛应用.
