复合内素PVP-SE1gp146的酶和抗菌活性,表达在汉森拉多态菌中
Abolghasem Asadi-Saghandi1, Mojgan Bandehpour2, Ali Hashemi3
1Department of Medical Biotechnology, School of Advanced Technologies in Medicine, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran.
Protein expression and purification
|November 13, 2023
概括
汉塞努拉多态菌成功地产生了内溶酶PVP-SE1gp146,为抗生素提供了一个有前途的替代方案,用于对抗耐药细菌. 这种GRAS宿主显示出开发新抗菌疗法的潜力.
科学领域:
- 微生物学 微生物学
- 生物技术是生物技术.
- 分子生物学分子生物学
背景情况:
- 抗生素耐药性是一个关键的全球健康威胁,需要新的治疗策略.
- 恩多利辛是细菌衍生的蛋白质,具有抗菌性质,与传统抗生素相比,耐药性发展的倾向较低.
- Hansenula polymorpha是一种GRAS (一般公认的安全) 酵母,为重组蛋白质生产提供了可行的和有利的宿主.
研究的目的:
- 为了设计汉森拉多态植物,以生产来自沙门氏菌的内素PVP-SE1gp146.6.
- 为了评估复合内溶酶的表达水平和酶活性.
- 评估内素对格拉姆阴性病原体的抗菌疗效.
主要方法:
- 编码内素PVP-SE1gp146的基因被克隆到H. polymorpha表达向量pHIPX4.4中.
- 重组载体pHIPX4-PVP-SE1gp146被转化为H.多态 NCYC495.5.
- 量化了蛋白质表达水平,并评估了 muralytic (酶) 活性.
- 抗菌活性被测试在具有代表性的阴性细菌物种上.
主要成果:
- 在H. polymorpha中,重组内素PVP-SE1gp146在约43mg/l的表达水平上成功产生.
- 恩多利辛表现出与大肠杆菌生产的版本相似的酶活性.
- 观察到针对Pseudomonas aeruginosa,大肠杆菌和Acinetobacter baumannii的显著抗菌活性.
- 针对Klebsiella pneumoniae.发现的活性很小.
结论:
- 汉塞努拉多尔摩法 (Hansenula polymorpha) 作为有效的宿主,产生功能性内素PVP-SE1gp146,有助于开发替代抗菌剂.
- 对H. polymorpha的GRAS地位提高了其治疗应用的潜力.
- 需要进一步的研究来优化内素度,增强针对K. pneumoniae等特定的阴性细菌的活性,并改善细菌细胞壁的向.
