牛卵细胞的组合外源激活:对促进成熟因子,线粒体激活蛋白激酶和胚胎能力的影响
Cecilia Valencia1, Felipe Pérez-García1, Luis Aguila1
1Laboratory of Reproduction, Centre of Reproductive Biotechnology (CEBIOR-BIOREN), Faculty of Medicine, Universidad de La Frontera, Temuco 4811322, Chile.
International journal of molecular sciences
|November 14, 2023
概括
使用循环赫西米德 (CHX),二甲基氨基纯氨酸 (DMAP) 和异粒素 (ANY) 进行蛋白质合成和酸化的双抑制有效地激活牛卵细胞. 这种方法通过上调关键转录来提高胚胎质量,而不会损害体外早期发育能力.
科学领域:
- 生殖生物学 生殖生物学
- 发展生物学 发展生物学
- 生物化学 生化学
背景情况:
- 卵细胞激活对于哺乳动物胚胎发育至关重要.
- 蛋白质合成和酸化的双重抑制在改善体外胚胎生产方面表现有前途.
- 了解卵细胞激活的分子动态对于优化辅助生殖技术至关重要.
研究的目的:
- 评估结合环胺 (CHX),二甲基氨基纯氨酸 (DMAP) 和异粒素 (ANY) 对牛卵细胞激活的作用.
- 研究这些抑制剂对成熟促进因子 (MPF) 和基激活蛋白激酶 (MAPKs) 动态的影响.
- 评估后来的胚胎发育潜力和质量.
主要方法:
- 牛卵细胞用CHX,DMAP和Any的组合进行了治疗.
- 分析MPF和MAPK路径组件 (CCNB1,CDK1,ERK1/2) 和它们的酸化状态.
- 评估裂变和胚胎细胞分裂率,胚胎细胞计数,TUNEL细胞灭绝试验和转录水平 (POU5F1,CDX2,BCL2A1/BAX比率).
主要成果:
- 在治疗组中,裂变和芽细胞细胞率以及关键细胞循环调节剂 (CCNB1,CDK1) 仍然相似.
- 特定的抑制剂组合对MAPK (ERK1/2和p-ERK1/2) 表达有不同的影响.
- 虽然整体胚胎细胞质量没有受到影响,但ANY + CHX + DMAP组合导致POU5F1转录水平更高,BCL2A1 / BAX比率更低,表明胚胎质量标志物得到改善.
结论:
- 蛋白质合成和酸化的双重抑制诱导MPF无 CCNB1 降解的失活,以及差异性MAPK失活.
- CHX,DMAP和ANY的联合使用不会损害早期体外胚胎发育能力.
- 这种联合的抑制策略对牛中与改善胚胎质量相关的转录物的表达产生了积极的影响.
