结合多复合的菌体显示,高通量测序和功能性检测作为识别针对FSHR的调节性VHH的平台
Anielka Zehnaker1, Amandine Vallet1, Juliette Gourdon1
1Physiologie de la Reproduction et des Comportements (PRC), Institut National de Recherche Pour l'Agriculture, l'Alimentation et l'Environnement (INRAE), Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS), Université de Tours, 37380 Nouzilly, France.
International journal of molecular sciences
|November 14, 2023
概括
研究人员开发了针对毛囊刺激激素受体 (FSHR) 的新型抗体 (VHH). 一个新的选择策略迅速确定了PRC1,一个积极调节FSHR活动的VHH,为生殖研究提供了潜在的工具.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 分子生物学分子生物学
- 免疫学 免疫学 免疫学
背景情况:
- 开发用于G蛋白结合受体 (GPCRs) 的调节抗体,例如卵泡刺激激素受体 (FSHR),存在重大挑战.
- FSHR是生殖功能的关键调节剂.
研究的目的:
- 开发一种用于识别针对FSHR的功能调节抗体的新策略.
- 隔离和描述调节FSHR活动的重链单抗体 (VHHs) 的新型可变域.
主要方法:
- 使用多重菌体显示器构建和选两个免疫VHH库.
- 下一代测序用于识别丰富的VHH序列.
- 使用cAMP响应元素 (CRE) 依赖的记者基因试验对VHHs的功能评估.
主要成果:
- 鉴定了34个特定丰富的VHH序列的集群.
- 23个VHH显示FSH诱导反应的显著正或负调节.
- VHH集群PRC1特别结合人类FSHR,并增强FSH诱导的cAMP产生和Gs招募.
结论:
- 改进的选择策略有效地快速识别对具有挑战性的膜受体具有功能活性的VHHs.
- PRC1是人类FSHR的第一个确定的阳性调节器VHH,在生殖医学中具有潜在的应用.
