一种重组的酸酶Algt1,在高度基质中具有制备酸寡糖的潜力

科学领域:

• 生物技术是生物技术.
• 酶学 是一种酶学.
• 碳水化合物化学 碳水化合物化学

背景情况:

• 酸酶对于从酸制备功能性寡糖 (AOS) 是至关重要的.
• 高酸盐粘度限制了酶性水解,特别是低度聚合 (DP) 碎片.
• 需要改进酸盐化酶以克服粘度限制并提高AOS生产.

研究的目的:

• 开发和表达一个高度活跃和稳定的酸酶 (Algt1) 从*Microbulbifer热耐受性*.
• 描述Algt1的酶特性,以有效地生产低DP的AOS.
• 评估Algt1在水解缩酸盐溶液中的性能.

主要方法:

• 结构域截断策略被用来设计PL7家族的酸盐酶Algt.
• 再组合Algt1被表达为 *Pichia pastoris*.
• 分析了缩酸盐的酶活性,稳定性,基质特异性 (TLC,FPLC,ESI-MS) 和水解.

主要成果:

• 与Algt (53.9 U/mg) 相比,工程Algt1显示出酸酶活性显著增加 (212.86 U/mg).
• Algt1表现出良好的热稳定性,在40°C下90分钟后保持80.9%的活性.
• Algt1有效地将酸盐化到20%的度,产生DP 1-4的AOS,主要产物是三和四糖.

结论:

• 工程Algt1表现出优越的活性,稳定性和对高度酸盐的耐受性.
• Algt1有效地产生具有较低聚合度的功能性寡糖类.
• 这些特性使Algt1成为工业规模AOS发电的有价值工具.