细胞外域,链和跨膜决定因素影响了新型抗艾滋病毒化学抗原受体 (CAR) 结构的表面CD4表达

科学领域:

• 免疫学 免疫学 免疫学
• 病毒学 病毒学
• 生物技术是生物技术.

背景情况:

• 化学抗原受体 (CAR) -T细胞疗法在艾滋病毒治疗方面显示出前景.
• 目前的CAR设计需要针对慢性艾滋病毒感染的有效性进行优化.

研究的目的:

• 在CAR细胞外,链和膜外域内识别关键元素,以增强新型抗HIVCARs的表面表达.
• 评估特定氨基酸基因对CAR表达和功能的影响.

主要方法:

• 构建新的抗艾滋病毒CARs,其外细胞,链和跨膜领域的变异.
• 使用流细胞计和共聚焦显微镜来评估CAR表面和细胞内表达.
• 评估工程CAR T细胞对艾滋病毒感染的细胞的细胞毒性活性.

主要成果:

• 一个新的CAR构造,将截断的CD4细胞外域与CD8α链/TM结合起来,最初只显示细胞内表达.
• 缩短CD8α链,并将LYC图案添加到CD8α TM域中,完全恢复了细胞内和细胞外CAR表达.
• 在LYC基因 (TTA或TTC) 中的突变严重废除了CAR表达.
• 删除FQKAS图案增强了CD4-CAR表面表达.
• 表面表达的CD4-CAR T细胞对HIV Env+点细胞表现出细胞毒性活性.

结论:

• 特定的元素,包括LYC图案和FQKAS连接,对于最佳的CAR表面表达至关重要.
• 需要进行结构分析,以制定设计HIV治疗有效CAR的基本准则.
• 优化的CAR-T细胞具有治疗慢性HIV感染的潜力.