从单个小鼠卵巢中分离单个细胞,用于流细胞计和功能分析
Enitome E Bafor1, Toni Martin1, Jeffrey Carrell2
1Cancer Innovation Laboratory, Center for Cancer Research, National Cancer Institute, Frederick, MD 21702, USA.
STAR protocols
|November 14, 2023
概括
这项研究详细介绍了一种经过验证的工作流程,用于隔离可行的单个小鼠卵巢细胞,这对于免疫细胞研究至关重要. 该协议增强了单细胞分析和体外测定,而无需将样本组合在一起.
科学领域:
- 生殖生物学 生殖生物学
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 细胞生物学 细胞生物学
背景情况:
- 卵巢细胞隔离通常需要组合样本,限制个人分析.
- 了解卵巢免疫细胞种群对于生殖健康研究至关重要.
研究的目的:
- 提出一个经过验证的工作流程,以从单个卵巢中分离出可活的单个小鼠卵巢细胞.
- 为了实现下游应用,如流细胞计和体外检测.
- 为了最大限度地提高免疫细胞的产量,包括T细胞子集.
主要方法:
- 详细的雌性分期,卵巢采集和酶分离.
- 优化了卵巢细胞染色协议,用于多参数分析.
- 对于适用于各种分析的单细胞悬浮液的工作流验证.
主要成果:
- 从一只小鼠中成功分离出足够多的可活单卵巢细胞.
- 单细胞悬浮剂在流细胞计和体外检测中已被证明是有用的.
- 免疫细胞的最大化隔离效率,包括特定的T细胞子集.
结论:
- 本工作流提供了一个强大的方法,用于单个小鼠卵巢单细胞隔离.
- 该协议有助于对卵巢免疫微环境进行详细分析.
- 该方法支持繁殖免疫学和细胞生物学中的多种下游应用.


