在猪鼠克隆胚胎中对线粒体DNA进行定量分析

科学领域:

• 生殖生物学 生殖生物学
• 发育生物学是发展生物学.
• 遗传学 是一个遗传学.

背景情况:

• 跨物种克隆在发育潜力和线粒体DNA兼容性方面带来了挑战.
• 在重建胚胎中了解供体细胞线粒体DNA (mtDNA) 的命运对于成功克隆至关重要.

研究的目的:

• 确定猪卵细胞是否可以作为跨物种克隆的受体,支持胚胎发育到囊胚阶段.
• 分析跨物种克隆胚胎中的线粒体DNA组成,特别是小鼠和猪mtDNA之间的相互作用.

主要方法:

• 使用胎儿纤维细胞作为捐赠细胞,生产跨物种 (老鼠-猪) 和内物种 (猪-猪) 克隆胚胎.
• 在物种内和物种间克隆胚胎之间比较发育速率和胚胎细胞数量.
• 实时聚合酶连锁反应 (PCR) 用于量化小鼠和猪的mtDNA复制数在不同发育阶段.

主要成果:

• 在小鼠-猪和猪-猪克隆胚胎之间,发育速率或胚胎细胞数量没有显著差异.
• 小鼠mtDNA拷贝数量减少,而猪mtDNA拷贝数量显著增加,从小鼠-猪克隆胚胎中的1细胞到芽细胞阶段.
• 在早期发育过程中证明了线粒体异质体和小鼠衍生的mtDNA逐渐被卵细胞衍生的mtDNA取代.

结论:

• 猪卵细胞是能够接受物种间克隆的受体,支持发展到胚芽细胞阶段.
• 鼠猪克隆胚胎表现出线粒体异质体,逐渐转向来自卵细胞的mtDNA.
• 这表明,在胚胎早期发育过程中,捐赠细胞线粒体被卵细胞线粒体所取代的机制存在.