全血RNA提取效率有助于RNA测序数据集的变化
William W Wilfinger1, Hamid R Eghbalnia2, Karol Mackey1
1Molecular Research Center, Inc. Cincinnati, OH, United States of America.
PloS one
|November 16, 2023
概括
血液RNA提取方法显著影响测序结果. 较低的RNA产量可能导致短mRNA和lncRNA转录的损失,影响数据准确性,并可能导致批量效应.
科学领域:
- 分子生物学分子生物学
- 基因组学就是基因组学.
- 生物信息学是一种生物信息学.
背景情况:
- RNA提取方法各不相同,导致恢复RNA的定量差异.
- 这些变异可以影响下游RNA测序结果,特别是mRNA和lncRNA.
- 了解这些影响对于准确的转录基因分析至关重要.
研究的目的:
- 评估不同血液RNA提取方法如何影响mRNA和lncRNA测序结果.
- 为了确定总RNA数量对转录恢复和表达分析的影响.
- 通过不同的提取方法来研究成绩单大小和测序结果之间的关系.
主要方法:
- 分析了三个已存档的血液RNA测序数据集.
- 评估RNA提取方法对mRNA和lncRNA恢复的影响.
- 标准化常见的成绩单,并绘制TPM计数和CV与成绩单大小的对比.
- 回归分析用于评估转录大小,TPM数量和CV之间的关系.
主要成果:
- 每毫升血液中较低的总RNA回收影响了表达较弱和短到中型转录的回收.
- 两个数据集显示,随着转录大小的增加,TPM计数下降,而一个数据集显示,计数增加与大小成比例.
- 跨提取方法的转录恢复变异性改变了转录大小和TPM数量之间的基本关系.
结论:
- 从全血中恢复的总RNA的数量显著影响RNA测序结果.
- 不完整的RNA提取直接影响mRNA和lncRNA转录的恢复.
- RNA提取效率的差异可能导致在测序数据中观察到的批量效应.


