基于细胞的试验,以确定Pseudomonas aeruginosa中的3型分泌系统转位子组合,使用分裂路西法酶
Hanling Guo1, Emily J Geddes2, Timothy J Opperman2
1Program in Molecular and Cellular Biology, University of Massachusetts, Amherst, Massachusetts 01003, United States.
ACS infectious diseases
|November 18, 2023
概括
一种新的测试检测了Pseudomonas aeruginosa中的3型分泌系统 (T3SS) 转位子组合. 这种工具有助于开发新的药物来对抗危险的耐药细菌感染.
科学领域:
- 微生物学与传染病的研究
- 分子生物学分子生物学
- 药物发现 药物发现 药物发现
背景情况:
- 多种药物耐药性*Pseudomonas aeruginosa*是医疗保健机构的一个重大威胁.
- 3型分泌系统 (T3SS) 是P. aeruginosa病变的一个关键毒性因素.
- T3SS转位子组合对于毒性和潜在的治疗点至关重要.
研究的目的:
- 开发一种基于全细胞的新型试验,用于检测T3SS转位子组合.
- 建立一种高通量选方法,用于识别T3SS组装的抑制剂.
主要方法:
- 使用一个分裂的NanoLuc luciferase报告员系统来读取转位子组装的读数.
- 开发了一种全细胞检测法,用于监测PopD N端突出进入宿主细胞的情况.
- 通过信号/噪声比和Z'-因子来评估测试性能.
主要成果:
- 这种新型试验成功检测出功能T3SS转位子组合.
- 实现了 13.6.6 的良好的信号/噪声比.
- 证明了测试稳定性,Z'-因子为0.67,适用于高通量选.
结论:
- 开发了一种新的,强大的T3SS转位子组装全细胞检测方法.
- 这种试验适用于小分子抑制剂的高通量选.
- 这些发现有助于开发针对P. aeruginosa*感染的新疗法.
