工程外细胞囊泡提供功能Cas9/gRNA,以消除乙型肝炎病毒ccccDNA和整合
Wanjia Zeng1, Liwei Zheng1, Yukun Li1
1Department of Microbiology and Infectious Disease Center, School of Basic Medical Sciences, Peking University Health Science Center, Beijing, People's Republic of China.
Emerging microbes & infections
|November 20, 2023
概括
工程外细胞囊 (EVs) 提供CRISPR/Cas9以清除乙型肝炎病毒 (HBV) DNA. 这种新的治疗方法显示了通过减少病毒抗原和ccDNA来治愈慢性HBV感染的希望.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 基因治疗 基因治疗
- 肝病学 肝病学是一种肝病学.
背景情况:
- 慢性乙型肝炎病毒 (HBV) 感染很难治愈,原因是持续的病毒DNA (cccDNA) 和集成到宿主基因组中.
- 克里斯普尔/卡斯9基因组编辑为病毒清除提供了潜力,但安全和高效的分娩仍然是一个挑战.
研究的目的:
- 开发一种有效的CRISPR/Cas9传递系统,以向和消除HBV DNA.
- 使用工程外细胞囊泡 (EVs) 提高CRISPR/Cas9传递的效率和安全性.
主要方法:
- 通过结合光诱导的异体化和蛋白质化来改善Cas9蛋白质加载,开发了工程EV.
- 囊性口腔炎病毒-糖蛋白 (VSV-G) 被纳入EVs,以增强受体细胞中的内体逃生和Cas9活性.
- 在HBV复制细胞模型和HBV小鼠模型中评估了工程EV的疗效和安全性.
主要成果:
- 改造的EV显示了Cas9蛋白的增强加载和基因编辑活动的改善.
- 在HBV细胞模型中,EVs有效降低了病毒抗原和共闭圆形DNA (cccDNA) 水平.
- 在HBV复制和转基因小鼠模型中证实了工程EV的抗病毒活性和高安全性.
结论:
- 工程EV成功实现了功能CRISPR/Cas9的HBVDNA清除,无论是*in vitro*还是*in vivo*.
- 这种方法导致了病例性ccccDNA和集成HBV DNA片段的清除.
- 工程电动汽车代表了治疗慢性HBV感染的有前途的新疗法策略.
更多相关视频
09:23Delivery of the Cas9/sgRNA Ribonucleoprotein Complex in Immortalized and Primary Cells via Virus-like Particles "Nanoblades"
Published on: March 31, 2021
5.0K
09:45Electroporation-Mediated Delivery of Cas9 Ribonucleoproteins and mRNA into Freshly Isolated Primary Mouse Hepatocytes
Published on: June 2, 2022
2.7K
