乳酸酸和免疫磁性净化的hiPSC衍生的心肌细胞产生类似的工程心脏组织结构

科学领域:

• 干细胞生物学 干细胞生物学
• 心血管研究的心血管研究.
• 蛋白质组学是指蛋白质组学.

背景情况:

• 来自人类诱导的多能干细胞衍生心肌细胞 (hiPSC-CMs) 的三维工程心脏组织 (ECT) 是心脏研究的宝贵模型.
• 之前的研究表明,hiPSC-CMs的代谢 (乳酸盐) 净化会诱导缺血性心肌病样表型,与基于磁性抗体的细胞分类 (MACS) 净化形成鲜明对比.

研究的目的:

• 调查乳酸净化与hiPSC-CMs的MACS净化是否影响得到的hiPSC-ECT的特性.
• 为了确定乳酸净化是否导致用于ECT生成的hiPSC-CM中不可逆转的表型变化.

主要方法:

• 使用乳酸基介质或MACS,分化和净化hiPSC-CMs.
• 纯化的hiPSC-CMs被整合到3DhiPSC-ECT中,并培养了4周.
• 进行了结构性 (sarcomere 长度),功能性 (同度摩擦力,Ca2+ 瞬态) 和蛋白质组学分析 (全球和定量蛋白质组学).

主要成果:

• 全球蛋白质组学揭示了在ECT形成之前的乳酸盐和MACS净化hiPSC-CM之间的差异表型.
• 在乳酸酸和MACS衍生的hiPSC-ECTs之间,没有观察到瘤长度,同度抽力或Ca2+短暂测量的显著差异.
• 定量蛋白质组学在最终的hiPSC-ECT中没有显示蛋白质通路表达或肌纤维蛋白质形式的显著差异.

结论:

• 通过乳酸盐或MACS净化的hiPSC-CMs产生具有可比结构,功能和蛋白质特性的ECT.
• 乳酸净化似乎不会在用于生成功能性工程心脏组织的hiPSC-CM中诱导不可逆转的有害表型.