对HBG促进体的基编辑诱导了强大的胎儿血红蛋白表达,在人类HSC中没有可检测的目标外突变
Wenyan Han1, Hou-Yuan Qiu2, Shangwu Sun3
1Gene Editing Center, School of Life Science and Technology, ShanghaiTech University, Shanghai 201210, China.
Cell stem cell
|November 21, 2023
概括
变压基编辑器 (tBE) 可以重新激活沉默的马球蛋白基因表达,以治疗β-hemoglobinopathies. 用tBE破坏血造干细胞中的BCL11A基因,安全有效地增加了胎儿血红蛋白水平.
科学领域:
- 血液学 血液学 血液学
- 基因治疗 基因治疗
- 分子生物学分子生物学
背景情况:
- β-hemoglobinopathies是一种由功能性血红蛋白减少或缺失引起的遗传性血液疾病.
- 重新激活沉默的马环球蛋白 (γ-globin) 表达是一种治疗策略,用于补偿缺陷的成年血红蛋白.
- 破坏那些沉默g-globin基因的调节元件是一个关键的方法.
研究的目的:
- 评估变压器基编辑器 (tBE) 在破坏转录因子结合动机以增强γ-环球蛋白表达的有效性和安全性.
- 确定最有效的干扰动机,以达到胎儿血红蛋白治疗水平.
- 将tBE与其他基因编辑工具进行比较,用于治疗β-hemoglobinopathies.
主要方法:
- 使用变压器基编辑器 (tBE) 破坏了血液造血干细胞 (HSC) 中的六种转录因子结合动机.
- 进行功能选,以确定产生最高γ-环球蛋白表达的动机.
- 将tBE与来自健康捐赠者和β-血病患者的HSC中的Cas9核酶和常规基编辑器 (ABE8e, hA3A-BE3) 进行比较.
- 评估胎儿血红蛋白水平,并进行全基因组和转录组测序,以检测非目标突变.
主要成果:
- 在HBG1/2促进体中,tBE对BCL11A结合基因的破坏导致了最高的γ-环球蛋白表达.
- 与其他测试方法相比,tBE介导的编辑在健康和患者衍生HSC/HPC中显示出优异的胎儿血红蛋白诱导.
- 在tBE中没有观察到可检测的DNA或RNA目标外突变.
- 在重新繁殖的HSC中观察到持久的编辑和持续的γ-环球蛋白表达.
结论:
- 在HBG1/2促进体中,tBE介导的BCL11A结合动机的破坏是重新激活γ-环球蛋白的一种高度有效的策略.
- 这种方法为β-hemoglobinopathies提供了安全和持久的治疗选择,没有可检测的非标效应.
- tBE代表了血液疾病的基因疗法有前途的进步.
