检测逆转录酶LAMP-放大核酸从口腔门病毒样使用生物化DNA探针通过横流试验检测口腔门病毒样
Saloni Agarwal1, Mojdeh Hamidizadeh1, Frank F Bier1,2
1Institute for Biochemistry and Biology, Chair of Molecular Bioanalysis and Bioelectronics, University of Potsdam, Karl-Liebknecht-Strasse 24/25, 14476 Potsdam, Germany.
Biosensors
|November 24, 2023
概括
这项研究开发了一种快速的,35分钟的核酸测试,用于SARS-CoV-2使用原始的喉拭子. 该试验实现了高灵敏度和特异性,使得在不需要样本预处理的情况下进行临床诊断.
科学领域:
- 分子生物学分子生物学
- 生物技术是生物技术.
- 诊断 诊断 诊断 诊断
背景情况:
- 目前对病原体的核酸测试通常需要大量的样本准备,限制了护理点的应用.
- 快速和灵敏的检测方法对于及时诊断和控制传染病至关重要.
研究的目的:
- 开发一种简化核酸检测点护理技术 (NAT-POCT) 用于病原体检测.
- 直接在快速检测中评估使用原始喉拭片样本的使用.
- 实施数字半量化方法,以提高读取精度.
主要方法:
- 使用原始的,热不活化的喉拭子样本直接用于复合酶辅助放大环介导同热放大 (RT-LAMP) 反应.
- 采用生物化DNA探针,以提高侧向流量测试 (LFA) 读数的特异性.
- 集成了一个基于智能手机的体外诊断 (IVD) 设备,用于LFA结果的数字半量化.
主要成果:
- RT-LAMP-LFA测定显示了98.11%的灵敏度和96.15%的特异性.
- 在35分钟的总检测时间内,达到3个RNA拷贝/μL (Ct-33) 的检测极限 (LoD).
- 数字半量化显示与qRT-PCR Ct值有很强的相关性 (R2 = 0.702).
结论:
- 开发的NAT-POCT平台是一个用于病原体检测的多功能生物传感器.
- 该测试消除了样品存储,运输和预处理的需要,促进了快速的护理点诊断.
- 这种方法在传染病监测和管理方面具有重大潜力.
