鼠标N2a神经母细胞瘤试验:不确定性和与替代细胞基试验的比较,用于检测西瓜托克辛
Sandra Raposo-Garcia1, Alejandro Cao1, Celia Costas1
1Departamento de Farmacología, Facultad de Veterinaria, Universidade de Santiago de Compostela, 27002 Lugo, Spain.
Marine drugs
|November 24, 2023
概括
检测鱼中毒 (CF) 需要更好的方法. 一个新的HEK293 Nav细胞系通过作用于通道来检测ciguatoxins (CTXs),从而提高食品安全.
科学领域:
- 食品安全 食品安全
- 海洋毒理学 海洋毒理学
- 细胞生物学 细胞生物学
背景情况:
- 由于ciguatoxins (CTXs) 的存在,ciguatera鱼类中毒 (CF) 越来越令人担忧.
- 目前用于CTX检测的N2a基于细胞的细胞毒性测定缺乏标准化,并且存在局限性.
- N2a细胞具有较低的通道可用性,容易受到ouabain (O) 和veratridine (V) 的损害.
研究的目的:
- 为了评估替代细胞系可靠和标准化ciguatoxin检测.
- 识别对CTXs敏感的细胞系,适合用于细胞毒性检测.
- 通过开发更快速的卷毒素分析方法来提高食品安全.
主要方法:
- 对N2a细胞和替代细胞系 (人类神经母细胞瘤,HEK293 Nav) 的评估.
- 使用经典细胞毒性测定 (MTT) 和不去除介质的方法 (LDH,Alamar蓝) 评估细胞活力.
- 测试对CTXs的敏感性,有或没有ouabain (O) 和veratridine (V) 敏感性.
主要成果:
- N2a细胞表现出低通道可用性和O/V的显著损伤.
- 人类神经母细胞瘤细胞由于高O / V敏感性和低通道表达不适合.
- HEK293 Nav细胞,表达通道,对CTXs敏感,没有O/V敏感.
- 使用O/V敏感化的MTT测定在HEK293 Nav细胞中检测到0.0001nM的CTX3C.
结论:
- HEK293 Nav细胞系是一种可行的替代品,用于检测毒素.
- 与传统方法相比,这种细胞系提供了更好的灵敏度和可靠性.
- 这一进步有助于改善食品安全和对西瓜毒素的监测.
