开发,评估和临床应用PRRSV-2类似疫苗的实时RT-PCR检测
Gaurav Rawal1, Karen M Krueger1, Wannarat Yim-Im1
1Department of Veterinary Diagnostic and Production Animal Medicine, College of Veterinary Medicine, Iowa State University, Ames, IA 50011, USA.
Viruses
|November 25, 2023
概括
新的实时RT-PCR测定准确检测猪生殖和呼吸系统综合征病毒2型 (PRRSV-2) 修饰的活病毒疫苗. 这些测试提供高灵敏度和特异性,用于区分常见的PRRSV-2疫苗.
科学领域:
- 兽医病毒学 兽医病毒学
- 分子诊断学 分子诊断
- 控制和控制猪病 控制和控制猪病
背景情况:
- 猪生殖和呼吸系统综合征病毒2型 (PRRSV-2) 改性活病毒 (MLV) 疫苗在猪生产中被广泛使用.
- 准确区分疫苗菌株和现场菌株对于疾病管理和流行病监测至关重要.
- 现有的诊断工具可能缺乏特异性或多重复合能力,无法有效识别和区分常见的PRRSV-2 MLV疫苗.
研究的目的:
- 开发和验证单复合实时RT-PCR测定,用于特定检测五种PRRSV-2 MLV疫苗.
- 开发和验证一个四重复的实时RT-PCR试验,用于同时检测和区分美国三种最常见的PRRSV-2疫苗.
- 与参考PCR方法相比,评估开发的试验的诊断性能.
主要方法:
- 开发单复数和四复数实时RT-PCR测定,针对特定的PRRSV-2 MLV疫苗病毒.
- 对非PRRSV猪病原体的特异性测试的验证.
- 使用临床样本和PRRSV-2分离物确定检测极限 (LOD),可重复性,诊断灵敏度,特异性和一致性.
主要成果:
- 单复式和四复式测试表明高特异性,没有与其他猪病毒和细菌的交叉反应.
- 检测极限在25至50个基因组拷贝/反应之间,在试验内和试验间具有很好的可重复性.
- 与基准PCR相比,临床样本的诊断性能显示出高灵敏度 (94.67-100%) 和特异性 (100%),与基准PCR相比,具有很好的一致性 (97.78-100%).
结论:
- 开发的实时RT-PCR测定可以专门检测和区分PRRSV-2 MLV疫苗病毒.
- 四个复合体检测可以同时检测和区分三种最常见的PRRSV-2疫苗.
- 这些测试为准确诊断和对猪群中PRRSV-2的表征提供了有价值的工具.
