CD4是日本脑炎病毒进入和在PK-15细胞中复制的重要宿主因素
Qi Wang1, Shuqing Yang1, Ke Yang1
1Research Center for Swine Diseases, College of Veterinary Medicine, Sichuan Agricultural, Chengdu 611330, China.
Veterinary microbiology
|November 25, 2023
概括
猪CD4蛋白作为日本脑炎病毒 (JEV) 的受体,促进其进入细胞. CD4敲击显著减少了JEV的附着和复制,突出显示了它在病毒感染中的作用.
科学领域:
- 病毒学 病毒学
- 细胞生物学 细胞生物学
- 免疫学 免疫学 免疫学
背景情况:
- 日本脑炎病毒 (JEV) 是亚洲病毒性脑炎的主要原因,由蚊子传播.
- JEV用于进入和复制的特定细胞受体尚未完全理解.
- 识别病毒受体对于理解JEV病原体和开发抗病毒策略至关重要.
研究的目的:
- 调查猪的CD4蛋白是否作为JEV进入PK15细胞的受体.
- 为了确定CD4对猪细胞内JEV复制的影响.
- 阐明 CD4 在 JEV 病变发生过程中的作用.
主要方法:
- 同免疫沉 (Co-IP) 证实JEV E蛋白与CD4相互作用.
- 病毒结合和内部化试验.
- CRISPR/Cas9基因编辑以创建CD4淘汰 (KD) PK15细胞系.
- 抗体阻断实验. 实验中的抗体阻断.
- 用RT-qPCR和Western Blot (WB) 来评估病毒转录和复制.
- 焦显微镜用于CD4和脂质的同位化.
主要成果:
- 证实了JEV E蛋白与猪的CD4蛋白之间的相互作用.
- CD4敲除显著降低了JEV吸附和内化,减少了病毒的附着.
- 阻断CD4抗体导致病毒转录率降低49.1%.
- 发现CD4蛋白与脂质一起聚合.
- 病毒复制在CD4KD细胞中被抑制,与野生类型细胞相比,病毒标位下降64%,感染后24小时.
结论:
- 猪的CD4蛋白质作为JEV进入PK15细胞的受体.
- JEV利用脂质相关的CD4进入猪细胞.
- CD4在JEV复制中发挥着重要作用,其缺乏会影响病毒增殖.
关键词:
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