一个微流体平台,用于对两极化视网膜色素上皮细胞进行时间分辨率的询问

科学领域:

• 生物技术是生物技术.
• 细胞生物学 细胞生物学
• 微流体学 微流体学

背景情况:

• 从细胞中以毫升体积测量低丰度分泌因子是具有挑战性的,因为度低.
• 现有的微流体装置提高了度,但阻碍了可靠的表型表征.

研究的目的:

• 开发一种新的微流体装置"Puck",以克服测量极化细胞分泌因子的局限性.
• 为了准确量化从顶和基底细胞表面分泌的蛋白质.

主要方法:

• 一个微流体"Puck"组件是使用激光切割的和现货部件设计和制造的.
• 在Transwell膜中的极化视网膜色素上皮 (RPE) 细胞被整合到Puck中以研究蛋白质分泌.
• 测量分泌的蛋白质,包括血管内皮生长因子 (VEGF),使用免疫测试在低氧条件下进行.

主要成果:

• 缺氧状况显著增加了RPE细胞的基础VEGF分泌 (1.40至1.68 ng/mL在2小时内,P < 0.0013).
• 在相同的缺氧条件下,角VEGF分泌保持不变.
• 计算流体建模证实了设备内的细胞的最小切割应力.

结论:

• "Puck"装置有效地测量了极化细胞对环境刺激的空间时间蛋白质分泌.
• 这项技术促进了细胞健康的验证,例如诱导多能干细胞衍生的RPE细胞,用于治疗应用.