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Updated: Jul 9, 2025
08:51
Quantification of Coenzyme A in Cells and Tissues
Published on: September 27, 2019
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对乙-辅酶A的色度,度和液体染色学-质谱学试验进行比较
Daniel S Kantner1, Emily Megill1, Anna Bostwick1
1Lewis Katz School of Medicine at Temple University, Department of Cardiovascular Sciences, Aging + Cardiovascular Discovery Center, Philadelphia, PA, 19140, USA.
Analytical biochemistry
|November 28, 2023
概括
通过比较乙-CoA测量方法,酶组件显示出有前途,而ELISA则失败了. 液体染色体质谱测定,特别是LC-HRMS,提供了可靠的乙-CoA量化和复杂化能力.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 代谢学 代谢学 代谢学
- 分析化学 分析化学
背景情况:
- 乙-协酶A (乙-CoA) 是许多细胞通路中的关键代谢物.
- 准确量化乙-CoA对于理解新陈代谢调节至关重要.
- 现有的乙-CoA测量技术缺乏标准化的比较,阻碍了数据的解释.
研究的目的:
- 为了比较商业上可用的乙-CoA量化套件的性能与基于质谱的测试.
- 评估不同乙-甲酸测量技术的可靠性和适用性.
- 评估多重复合乙-CoA测量的潜力.
主要方法:
- 对比色度ELISA,度酶组件,液体染色学-双重质谱学 (LC-MS/MS) 和液体染色学-高分辨率质谱学 (LC-HRMS).
- 用纯标准和生物矩阵验证了测试结果.
- 评估矩阵效应,提取效率和稳定同位素标记的内部标准的实用性.
- 使用LC-HRMS对短链乙烯-CoAs的多重复合能力的演示.
主要成果:
- 颜色测量ELISA套件产生了无法解释的结果,即使使用纯标准.
- 度酶组件显示了与LC-MS测定相似的结果,取决于样本矩阵和提取.
- LC-MS/MS和LC-HRMS测定产生了高度一致的结果,特别是稳定的同位素标记的内部标准.
- 在白血病细胞系和患者样本中,LC-HRMS成功实现了各种短链乙-CoA的多重量化量化.
结论:
- 在特定条件下,度酶基套件提供了一种可行的替代物质谱法,用于在特定条件下量化乙-甲酸.
- LC-MS/MS和LC-HRMS是准确的乙-CoA测量的可靠方法,LC-HRMS提供卓越的多重复合能力.
- 标准化的比较对于选择合适的乙-A测定和解释代谢数据至关重要.
