开发一种半自动化的MHC相关蛋白组学 (MAPPs) 方法,使用基于斯特雷普塔维丁珠的免疫亲和捕获和纳米LC-MS/MS来支持药物开发中的免疫性风险评估
M Violet Lee1, Ola M Saad1, Sylvia Wong1
1Department of Bioanalytical Sciences, Genentech, Inc., South San Francisco, CA, United States.
Frontiers in immunology
|November 29, 2023
概括
我们开发了一种半自动化主要基因相容性复合体 (MHC) 相关蛋白质组 (MAPPs) 方法来评估生物治疗免疫性. 这种改进的方法提高了识别T细胞表位的可复制性和灵敏性,有助于药物开发.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 蛋白质组学是指蛋白质组学.
背景情况:
- 评估生物治疗性免疫性对于药物安全至关重要.
- 主要基因相容性复合体 (MHC) 相关蛋白质组 (MAPPs) 识别T细胞表位,但需要优化.
- 现有的手动MAPP方法可能缺乏可重现性和灵敏性.
研究的目的:
- 开发和优化半自动化MAPPs工作流程,以加强生物治疗药物的免疫性风险评估.
- 为了提高MAPP的可复制性,灵敏性和强度,使用基于磁珠的免疫亲和度捕获.
- 评估半自动化MAPPs方法在具有不同临床免疫原性的生物疗法中的性能.
主要方法:
- 使用功能化的磁珠和KingFisher处理器建立了一个半自动化的MAPPs工作流.
- 优化侧重于抗体合,溶酸盐化,洗和化步骤.
- 生物素/链维丁 (SA) 捕获抗体系统和磁珠取代了传统的方法.
主要成果:
- 半自动化MAPPs方法证明了改进的可重复性,在一天内和一天之间变化最小.
- 灵敏度得到增强,允许使用更少的细胞进行分析.
- 具有较高免疫性 (≥10%的ADA发病率) 的生物治疗药物与发病率较低的生物治疗药物相比,始终产生更多的和.
结论:
- 半自动化的MAPPs工作流提供了一个强大的和可重复的平台,用于T细胞表位标识.
- 这种方法为免疫性预测提供了可靠的数据,有助于生物治疗的发展.
- 适应性的工作流程使各种捕获抗体的整合更容易,以便更广泛地应用.


