基于血清饥饿的卵巢癌细胞休眠诱导和终止的方法in vitro
Szymon Rutecki1,2, Agnieszka Leśniewska-Bocianowska1, Klaudia Chmielewska1
1Department of Pathophysiology of Ageing and Civilization Diseases, Poznań University of Medical Sciences, Poznań 61-848, Poland.
Biology methods & protocols
|November 29, 2023
概括
血清饥饿提供了一种可靠的方法来诱导上皮卵巢癌 (EOC) 细胞的休眠状态. 这种简单的协议可以有效地唤醒休眠的EOC细胞进行体外研究.
科学领域:
- 在瘤学瘤学.
- 细胞生物学 细胞生物学
- 癌症研究 癌症研究
背景情况:
- 表皮卵巢癌 (EOC) 复发与休眠的癌细胞重新唤醒有关.
- 有限的EOC休眠模型阻碍了对这种现象的研究.
研究的目的:
- 开发一个方便和可靠的协议,以诱导和研究EOC细胞休眠期在体外.
- 为了研究与血清饥饿诱导的休眠相关的分子变化.
主要方法:
- 血清饥饿协议适用于EOC细胞系 (A2780,OVCAR-3,SKOV-3) 和初级EOC细胞.
- 使用Ki67,PKH26和细胞循环分析监测细胞生长停止和增殖.
- 评估ERK1/2/p38MAPK活动,亡和衰老.
主要成果:
- 72小时的血清饥饿诱导了G0/G1在显著细胞部分的生长停止.
- 增长停止与Ki67和ERK1/2/p38MAPK活性降低有关,没有亡或衰老.
- 血清的重新引入 (5%) 使细胞能够恢复增殖潜力.
- 线粒素C在诱导或终止休眠时无效.
结论:
- 血清饥饿是一种实用且有效的方法,可以诱导上皮卵巢癌细胞的休眠状态.
- 该协议促进了对EOC休眠和复发机制的进一步体外研究.
