开发一个四重复实时定量RT-PCR,用于检测和区分PHEV,PRV,CSFV和JEV
Xin Hu1, Shuping Feng2, Kaichuang Shi1,2
1College of Animal Science and Technology, Guangxi University, Nanning, China.
Frontiers in veterinary science
|November 29, 2023
概括
一种新的四重复实时定量RT-PCR (qRT-PCR) 试验可以快速检测和区分四种猪病毒:猪血合性脑炎病毒 (PHEV),猪伪狂犬病病毒 (PRV),古典猪瘟病毒 (CSFV) 和日本脑炎病毒 (JEV). 这种敏感而准确的方法有助于诊断猪的神经疾病.
科学领域:
- 兽医病毒学 兽医病毒学
- 分子诊断学 分子诊断学
- 猪病监测 猪疾病监测
背景情况:
- 猪血性脑炎病毒 (PHEV),猪伪狂热病毒 (PRV),古典猪瘟病毒 (CSFV) 和日本脑炎病毒 (JEV) 在猪中引起重叠的神经症状,使诊断复杂化.
- 准确的实验室检测对于这些猪病原体的差异诊断至关重要.
研究的目的:
- 开发和验证一个四重复实时定量RT-PCR (qRT-PCR) 试验,用于同时检测和区分PHEV,PRV,CSFV和JEV.
- 评估开发的测定方法的灵敏度,特异性和可重复性.
主要方法:
- 针对PHEV (N基因),PRV (gB基因),CSFV (5'UTR) 和JEV (NS1基因) 独特基因的特定原料和探针组的设计.
- 开发用于同时检测的四重复 qRT-PCR 试验.
- 使用临床样本验证试验,并与现有方法进行比较.
主要成果:
- 四重复 qRT-PCR 试验表现出高灵敏度,每个病原体的检测极限为 1.5 × 101副本/μL.
- 该试验显示高特异性,没有与其他常见的猪病毒观察到交叉反应.
- 对1977个临床样本的测试显示,PHEV的阳性率为1.57%,PRV为0.35%,CSFV为1.06%,JEV为0.10%,与现有测试相比,巧合率高 (>99.90%).
结论:
- 开发的四重复 qRT-PCR 试验是一种快速,灵敏和准确的工具,用于同时检测和区分猪中的 PHEV,PRV,CSFV 和 JEV.
- 这种测试可以显著改善这些重要的猪病的诊断和监测.
- 该试验为例行实验室检测和流行病学研究提供了有价值的替代方案.
