从海洋衍生的光细菌中克隆,表达,净化和对低温奇替纳酶PBCHI5基因的功能研究

科学领域:

• 酶学 是一种酶学.
• 海洋微生物学 海洋微生物学
• 生物技术是生物技术.

背景情况:

• 基是第二大碳来源,可产生基托寡糖,在医药,化品和农业中具有应用.
• 有效和稳定的基因酶对于推进基因衍生物研究和工业应用至关重要.

研究的目的:

• 发现和描述一种具有高效率和稳定性的新型低温酸酶.
• 为工业发展阐明已识别的酸酶的降解机制.

主要方法:

• 隔离了一个低温酸酶生成菌株,光细菌 sp. LG-29,来自深海的泥.
• 利用分子生物学,生物化学和生物信息学来进行酶表征.
• 酶净化和动力参数的确定 (Km,Kcat).

主要成果:

• 纯化基因酶 (PbCHI5) 的特定活性为21.036 U/mg.
• 在35°C具有最佳活性,在4°C具有持续活性,表现出低温酶性质.
• 在性环境 (pH 11) 中具有很高的稳定性,其活性受特定金属离子的影响 (激活剂:Mn2+,Ca2+,Mg2+;抑制剂:Fe2+,Zn2+).
• PbCHI5表现出内核酶和外核酶活性,其理论PI为4.16.

结论:

• 这项研究为开发和利用新型低温基因酶提供了理论基础.
• 这种特征化的酶在酸衍生品行业中具有应用潜力.