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Updated: Jul 17, 2026

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A Protocol for the Production of KLRG1 Tetramer
Published on: January 12, 2010
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从纳入体中对复合乳酸脱酶产生的综合评估
Chika Linda Igwe1, Jan Niklas Pauk1, Don Fabian Müller2
1Competence Center CHASE GmbH, Hafenstraße 47-51, Linz 4020, Austria; Institute of Chemical, Getreidemarkt 9, Vienna 1060, Austria.
Journal of biotechnology
|November 30, 2023
概括
使用包容体 (IB) 过程优化了重组乳酸脱酶 (LDH) 生产,实现了时空产量的近3倍增长. 重复折叠回收了50%的活性LDH,适合各种商业应用.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 蛋白质工程是指蛋白质工程.
- 酶的生产 酶的生产
背景情况:
- 乳酸脱酶 (LDH) 对诊断和生物传感器至关重要,但目前的生产方法产生少量可溶性蛋白质.
- 包容体 (IB) 过程为重组蛋白质生产提供更高的产量和纯度.
研究的目的:
- 评估使用纳入体 (IB) 生产用于重组乳酸脱酶 (LDH) (ldhL1) 的可行性.
- 优化发酵和下游加工,以提高LDH生产和生物活性.
主要方法:
- 开发了一种料批发发酵策略,以促进IB在可溶性蛋白质上形成.
- 优化了IB处理的溶解和重新折叠条件.
- 描述了重新折叠的LDH的酶活性和动力特性.
主要成果:
- 通过优化发酵参数 (qs = 0.25 g/g/h, 37°C) 实现了时空产量的近3倍增加.
- 成功开发了溶解和重新折叠的协议,恢复了50%的活性ldhL1.
- 再折叠的LDH在pH值为5.5和30°C时表现出最佳活性,具有高的催化效率.
结论:
- 包容体生产是高产量的重组LDH (ldhL1) 的可行策略.
- 优化下游处理是最大限度地提高活性蛋白质回收的关键.
- 描述的LDH酶适用于商业应用,特别是在低pH环境中.
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