从新鲜和冷保存的牛十二指肠组织培养体
Koki Nishihara1, Katie M Wood1, Le Luo Guan2
1Department of Animal Biosciences, Animal Science and Nutrition, University of Guelph, Guelph, ON, Canada N1G 1Y2.
JDS communications
|December 4, 2023
概括
使用胎儿牛血清 (FBS) 和二甲基硫氧化物 (DMSO) 进行牛肠道组织的冷保存,可以成功培养体. 该方法支持从新鲜和保存的组织中对肠道功能和健康进行实验室研究.
科学领域:
- 兽医医学 兽医医学 兽医医学
- 胃肠病学 胃肠病学
- 细胞生物学 细胞生物学
背景情况:
- 体是研究肠道生理学和疾病的有价值的模型.
- 肠道组织的冷保存对于长期储存和研究可访问性至关重要.
- 开发牛肠组织的有效冷保存方法对于推进牛健康研究至关重要.
研究的目的:
- 开发和验证一种用于冷保存牛肠组织的方法,用于体培养.
- 为了评估从冷保存的肠道组织中获得的肠道细胞的生命力和生长,与新鲜的肠道组织相比.
- 建立一个可靠的协议,从冷保存的牛十二指肠组织产生体.
主要方法:
- 采集了牛十二指肠组织 (在FBS/DMSO中新鲜和冷保存).
- 使用EDTA/PBS隔离了密室,并嵌入了地下室膜提取物.
- 隔离的密室被培养在IntestiCult有机生长介质中,添加了添加剂.
- 在7天内和跨通道的时间内监测了体发育,生长和形态.
- 进行了F-actin染色,以评估刷边缘微小菌.
主要成果:
- 在24小时内,从新鲜和冷保存的组织中形成的体.
- 从种植的第3天开始观察到芽的密室领域.
- 从第1天到第7天,在通道0和通道1中,体面积显著增加.
- 与通道0相比,通道1中的体表现出更大的面积.
- F-actin染色证实了体上刷边缘微的存在.
结论:
- 一种FBS和DMSO的冷保存溶液对牛肠道组织是有效的.
- 这种方法可以从冷保存的牛肠道组织中培养体.
- 已建立的协议使得实验室可以使用来自牛的肠杆菌来研究肠功能.
