开发一种可扩展的单一工艺,用于生产SARS-CoV-2 RBD单体和二元疫苗抗原

科学领域:

• 生物技术是生物技术.
• 疫苗学 疫苗学 疫苗学
• 蛋白质工程是指蛋白质工程.

背景情况:

• 有效的COVID-19疫苗的开发依赖于高质量的抗原.
• SARS-CoV-2受体结合域 (RBD) 是中和抗体的关键目标.
• 现有的疫苗平台使用不同形式的RBD,需要灵活的生产方法.

研究的目的:

• 为单体和二元SARS-CoV-2 RBD抗原建立一个单一的,可扩展的制造工艺.
• 描述产生的RBD抗原的质量属性和免疫性.
• 证明该过程的适应性,用于未来针对新兴变种的疫苗开发.

主要方法:

• 在中国仓鼠卵巢 (CHO) -K1细胞中RBD (319-541) -His6的表达.
• 优化培养条件,包括铜补充和 perfusion 培养.
• 使用固定金属离子亲和色谱 (IMAC),离子交换和尺寸排除色谱进行净化.
• 对抗原结构,完整性和体外相互作用的全面分析.

主要成果:

• 一个统一的过程成功地在实验室和大尺度 (500L) 中产生了单体和二元RBD抗原.
• 铜补充剂被发现可以提高RBD净化IMAC性能.
• 广泛的表征证实了产生的抗原的质量属性,包括结构,纯度和稳定性.
• 两种RBD形式都在小鼠中显示出ACE2结合和免疫性.

结论:

• 开发的过程使灵活,大规模生产高质量的SARS-CoV-2 RBD抗原.
• 这种制造方法支持快速适应新的SARS-CoV-2变种和各种疫苗平台.
• 鉴定出的单体和二体RBD抗原符合COVID-19疫苗生产所需的标准.