一个综合策略,涉及高通量测序,以描述加拿大未知的转基因小麦事件
Marie-Claude Gagnon1, Marc-Olivier Duceppe1, Adam Colville1
1Canadian Food Inspection Agency (CFIA), Ottawa, Ontario, Canada.
Plant biotechnology journal
|December 5, 2023
概括
在加拿大发现未经授权的抗草甘小麦 (MON71200事件). 研究人员开发了特定的qPCR测试,以检测这种转基因小麦,这对于监管合规和食品安全至关重要.
科学领域:
- 农业生物技术 农业生物技术
- 分子生物学分子生物学
- 遗传学 是一个遗传学.
背景情况:
- 在加拿大阿尔伯塔省发现了一种未经授权释放的耐草甘小麦,被确定为MON71200事件.
- 这一发现需要对转基因小麦进行表征,并开发检测方法.
研究的目的:
- 识别未经授权的转基因小麦的遗传元素和整合部位.
- 开发和验证用于MON71200检测的构造特异性和事件特异性定量PCR (qPCR) 试验.
主要方法:
- 基于PCR的测试,桑格测序,基因组步行,珠子捕获和高通量测序被采用.
- 开发两种结构特异的qPCR测定,针对特定的DNA结点.
- 开发针对小麦基因组的3'结点的特定事件的qPCR测定.
主要成果:
- 证实了CaMV 35S促进体 (p35S),大米动素1内突 (RactInt1),CP4-EPSPS基因和诺帕林合成酶终结体 (tNOS) 元素的存在.
- 插入被映射到染色体3B,并确定了可能的转变向量pMON25497,确认小麦是MON71200事件.
- 结构特异性和事件特异性qPCR测定都显示了种子池中0.10%MON71200的检测极限.
结论:
- 特定事件的qPCR测定没有显示与其他转基因事件的交叉反应性,确保准确检测MON71200.
- 开发的检测策略为识别和描述农产品中未知的转基因事件提供了一个强大的模型.
