基于PER-CRISPR/Cas14a系统的电化学生物传感器用于检测ctDNA EGFR L858R
Jing Qi1, Qianyi Qi1,2, Zhou Zhou1,2
1Research Center of Clinical Medicine, Affiliated Hospital of Nantong University, Medical School of Nantong University, Nantong 226001, China. wangfengfy@ntu.edu.cn.
Analytical methods : advancing methods and applications
|December 7, 2023
概括
一种新的电化学生物传感器结合了PER和CRISPR/Cas14a,用于敏感检测循环瘤DNA (ctDNA) 中的EGFR L858R突变. 这种方法有助于诊断和个性化治疗非小细胞肺癌 (NSCLC).
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 分子诊断学 分子诊断
- 生物传感器技术技术
背景情况:
- 在循环瘤DNA (ctDNA) 中表皮生长因子受体 (EGFR) L858R突变对于非小细胞肺癌 (NSCLC) 诊断和个性化治疗至关重要.
- 目前的检测方法可能缺乏早期和准确诊断所需的灵敏度或特异性.
研究的目的:
- 开发一种新的电化学生物传感器,用于对ctDNA EGFR L858R突变的敏感和特定检测.
- 将初始交换反应 (PER) 与CRISPR/Cas14a技术集成,以增强信号放大和检测.
主要方法:
- 使用了原料交换反应 (PER) 的组合用于异热放大和CRISPR/Cas14a用于目标识别和信号生成.
- 在金电极表面上使用基板ssDNA-MB构建了一种电化学生物传感器.
- 量化了EGFR L858R通过测量电化学回氧信号波动在基质被CRISPR/Cas14a切割时.
主要成果:
- 对EGFR L858R.的低检测极限达到0.34 fM.
- 展示了从1 fM到1 μM的广泛动态检测范围.
- 该PER-CRISPR/Cas14a生物传感器表现出极好的特异性,可重复性,稳定性和良好的恢复性.
结论:
- 开发的PER-CRISPR/Cas14a电化学生物传感器为检测ctDNA EGFR L858R.提供了高度敏感和高效的策略.
- 这种新的平台具有显著的潜力,可以改善NSCLC的临床诊断和个性化治疗.


