基于Glai辅助的EXPAR的无标签光传感策略,用于快速准确量化人类甲基转酶活性
Qiaomin Wu1, Yang Yu2, Mengqi Chen2
1Clinical Laboratory, Dongyang People's Hospital, Dongyang, Zhejiang, 322100, China; Key Laboratory of Medical Laboratory Diagnostics of the Education Ministry, College of Laboratory Medicine, Chongqing Medical University, Chongqing, 400016, China.
Talanta
|December 7, 2023
概括
一个新的生物传感器平台,DS-GlaI-EXPAR,可以快速和灵敏地检测DNA甲基转移酶1 (DNMT1) 活性. 这种工具对于癌症诊断和药物发现至关重要,因为它可以有效量化DNMT1水平.
科学领域:
- 表观遗传学和分子生物学
- 生物技术和生物传感器发展
- 癌症研究和诊断的研究和诊断.
背景情况:
- DNA甲基化是一种关键的表观遗传修饰,DNA甲基转移酶 (DNMT) 酶发挥着关键作用.
- 异常DNMT表达,特别是DNMT1,与各种癌症密切相关.
- 现有的检测DNMT活动的方法通常是复杂的,耗时的,缺乏灵敏度.
研究的目的:
- 开发一种新的,快速,简单和敏感的生物传感器平台,用于检测DNMT1活动.
- 为了利用半甲基化双链DNA (dsDNA) 基质和Glai辅助的异热指数放大反应 (EXPAR) 来进行信号放大.
- 为早期癌症诊断和发现DNMT1抑制剂提供一种工具.
主要方法:
- 该DS-GlaI-EXPAR平台使用半甲基化dsDNA作为DNMT1.1的基质.
- DNMT1甲基化dDNA,然后被Glai识别和分裂.
- 通过GlaI的裂变触发EXPAR实时光信号放大,使敏感的DNMT1活动量化.
主要成果:
- DS-GlaI-EXPAR平台实现了0.86 pg/μL的低检测极限.
- 整个检测过程在一个单管中在2.5小时内完成.
- 与HEK293细胞相比,在MCF-7细胞中观察到显著更高的DNMT1活性,以及Apt. #9 抑制得到验证.
结论:
- DS-GlaI-EXPAR平台为DNMT1活动检测提供了一种方便,有效和高度敏感的方法.
- 这种生物传感器克服了传统方法的局限性,提供了快速和具体的结果.
- 该平台具有早期癌症诊断和对DNMT1向药物的查的巨大潜力.
