使用转换相关重组 (TAR) 克隆成酵母菌中心体等离子体进行菌体基因组"重新启动"的强大和可重复的协议
Ivan Baykov1,2, Olga Kurchenko3,4, Ekaterina Mikhaylova3,4
1Laboratory of Molecular Microbiology, Institute of Chemical Biology and Fundamental Medicine SB RAS, Novosibirsk, Russia. ivan_baykov@mail.ru.
Methods in molecular biology (Clifton, N.J.)
|December 8, 2023
概括
重新启动菌体基因组对于菌体编辑和合成生物学至关重要. 本章详细介绍了使用本地或中间宿主从基因组中产生传染性菌体的方法.
科学领域:
- 微生物学 微生物学
- 合成生物学 合成生物学
- 病毒学 病毒学
背景情况:
- 菌体基因组操纵对于推进基因工程和合成菌体的创造至关重要.
- 从它们的遗传物质中重组传染性菌体的过程被称为"基因组重启".
- 对于高效的菌体基因组重建,需要标准化的协议.
研究的目的:
- 为细菌体基因组"重启"提供详细的协议.
- 为了使从工程或合成基因组中产生感染性菌体.
- 促进菌体治疗和合成病毒学方面的研究.
主要方法:
- 使用本地主机"重启"基因组.
- 使用中间主机"重新启动"基因组.
- 对T7菌体 (大肠杆菌宿主) 和KP32_192菌体 (Klebsiella pneumoniae宿主) 的详细协议.
主要成果:
- 成功"重新启动"T7菌体基因组.
- 成功"重新启动"了KP32_192菌基因组.
- 从它们的基因组中产生传染性菌体的可行方法的演示.
结论:
- 描述的"重启"协议对于产生传染性菌体是有效的.
- 这种方法支持创建合成菌体和基因组编辑应用程序.
- 这些协议适用于不同的菌体-宿主系统,包括T7和KP32_192.2.
