使用CRISPR/Cas12a侧流带快速视觉检测非洲猪瘟病毒,基于结构蛋白基因D117L的基因D117L

科学领域:

• 分子生物学分子生物学
• 病毒学 病毒学
• 生物技术是生物技术.

背景情况:

• 非洲猪瘟病毒 (ASFV) 在猪群中造成重大经济损失.
• 目前有效的疫苗和治疗方法的局限性需要改进的诊断工具.
• 快速和准确的检测对于控制非洲猪瘟 (ASF) 传播至关重要.

研究的目的:

• 开发一种新的,快速的,可视检测方法来检测非洲猪瘟病毒 (ASFV).
• 建立基于p17基因的ASFV高度敏感和特定的诊断试验.

主要方法:

• 开发一种检测试验,将重组聚合酶放大 (RPA) 与Cas12a介导的侧流条 (Cas12a-LFS) 结合起来.
• 针对ASFV结构蛋白p17基因 (D117L) 进行检测.
• 使用临床样本进行验证,并与定量PCR (qPCR) 进行比较.

主要成果:

• 已建立的RPA-Cas12a-LFS方法实现了高达两个基因副本的灵敏度.
• 该试验表现出高特异性,没有观察到与其他九种猪病毒的交叉反应.
• 在对68个临床样本进行传统qPCR测试时,观察到100%的巧合率.

结论:

• 一种简单,快速,敏感和特定的ASFV视觉检测方法已经成功开发出来.
• RPA-Cas12a-LFS测定显示出在现场检测ASFV的巨大潜力.
• 这种方法为预防和控制非洲猪瘟提供了有价值的工具.