隔离方法对介质干细胞衍生的细胞外囊泡的特征和功能活性的影响
Ricardo Malvicini1, Giada De Lazzari2, Anna Maria Tolomeo3
1Laboratorio de Regulación Génica y Células Madre, Instituto de Medicina Traslacional, Trasplante y Bioingeniería, Universidad Favaloro-Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas, Buenos Aires, Argentina; Department of Women's and Children's Health, University of Padua, Padua, Italy; Laboratory of Extracellular Vesicles as Therapeutic Tools, Fondazione Istituto di Ricerca Pediatrica Città della Speranza, Padua, Italy; LIFELAB Program, Consorzio per la Ricerca Sanitaria, Padua, Italy.
与超过 (UF) 相比,离子交换色谱 (IEX) 给出了更多的RNA和蛋白质,以及与超过 (UF) 相比,对介质细胞流体细胞衍生的细胞外囊泡 (MSC-EVs) 产生了更大的免疫调节效应. 对于临床级MSC-EV生产,IEX可能会优于IEX.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 细胞生物学 细胞生物学
- 免疫学 免疫学 免疫学
背景情况:
- 细胞外囊泡 (EV) 隔离方法影响EV群体的纯度和特性.
- 介质细胞 stromal 细胞衍生的 EVs (MSC-EVs) 是有前途的临床应用.
- 对比隔离方法对于生产临床级EVs至关重要.
研究的目的:
- 为了比较离子交换色谱 (IEX) 和超过 (UF) 用于分离临床级的MSC-EVs.
- 评估IEX和UF对MSC-EV组成和功能的影响.
- 确定生产强效MSC-EV的最佳方法.
主要方法:
- 使用IEX和UF的纯化MSC-EV.
- 评估的粒子大小,分布,形态和度 (蛋白质,脂质,RNA).
- 在巨细胞和T细胞测定中评估免疫调节活性,以及蛋白质和细胞因子分析.
主要成果:
- IEX和UF的颗粒数量,大小和脂质含量都相当.
- 与UF相比,IEX产生了10倍多的RNA和更多的蛋白质量.
- IEX-EVs显著增强了对巨细胞和T细胞的免疫调节作用,对关键的抗炎细胞因子的丰富度更高.
结论:
- 由IEX和UF分离的MSC-EV具有相似的物理化学和表型特征.
- 这两种方法都产生具有抗炎活性的EV.
- 在临床应用中,MSC-EVs的IEX隔离可能是优越的,因为其增强的效能和细胞因子含量.
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