培养并通过基因表达模式评估的玻璃化火卵巢组织:一个潜在的查工具
George B Hall1, Amy Shannon2, Diane Hildenberger2
1Animal Biosciences and Biotechnology Laboratory, Agricultural Research Service, US Department of Agriculture, Beltsville, MD, 20705, USA; USDA-ARS Research Participation Program, Oak Ridge Institute for Science and Education (ORISE), 1299 Bethel Valley Rd, Oak Ridge, TN, 37830, USA.
Cryobiology
|December 10, 2023
概括
使用标准玻璃化方案冷保存火卵巢组织会导致显著的长期冷损伤. 优化该协议对于保存雌性火遗传和改善毛囊在变暖后的存活是至关重要的.
科学领域:
- 生殖生物学 生殖生物学
- 低温生物学 低温生物学
- 动物遗传学动物遗传学
背景情况:
- 生物银行土耳其卵巢组织对于保存女性遗传至关重要.
- 标准玻璃化方案的长期冷损伤在很大程度上是未知的.
- 之前的研究主要集中在温暖后的即时分析.
研究的目的:
- 在玻璃化后调查火卵巢组织的长期冷损伤.
- 为了比较标准的玻璃化 (StV) 协议与不良的玻璃化 (PV) 协议和新鲜组织.
- 评估卵巢培养对卵巢组织活力和基因表达的影响.
主要方法:
- 土耳其卵巢组织接受了新鲜 (非玻璃化),PV和StV协议.
- 组织在ovo培养长达6天.
- 评估包括细胞形态和mRNA基因表达 (HSPA2,GDF9).
主要成果:
- 热冲击蛋白A2 (HSPA2) mRNA水平在加热后立即在玻璃化组织中显著升高.
- 到培养的第六天,成长决定性因素9 (GDF9) mRNA水平在玻璃化组织中显著降低.
- 在6天内卵子培养后,毛囊密度在新鲜组织中最高,其次是StV,在PV中最低,与新鲜组织相比,StV显示~65%的损失.
结论:
- 标准的玻璃化方案会对火卵巢组织造成显著的长期冷损伤.
- HSPA2和GDF9的mRNA表达可以作为早期和晚期查标记,分别用于玻璃化协议的有效性.
- 标准玻璃化方案的进一步优化是必要的,以改善卵泡的存活率和数量.
