鉴定多巴胺基内腔中脑前代细胞分泌的生物标志物
Pedro Rifes1,2, Marc Isaksson3,4,5, Charlotte Rusimbi2
1Novo Nordisk Foundation Center for Stem Cell Medicine - reNEW, University of Copenhagen, Blegdamsvej 3B, 2200, Copenhagen, Denmark.
Stem cell research & therapy
|December 10, 2023
概括
研究人员确定了新型分泌蛋白标记物,以区分尾部腹腔中脑 (VM) 先生的细胞,这对于帕金森病 (PD) 细胞治疗至关重要. 一种LGI1/CORIN比率测定为临床制造这些多巴胺原生细胞提供了一种新的质量控制方法.
科学领域:
- 干细胞生物学 干细胞生物学
- 神经科学是一个神经科学.
- 蛋白质组学是指蛋白质组学.
背景情况:
- 人类多能干细胞衍生的腹腔中脑 (VM) 多巴胺原体细胞正在研究帕金森病 (PD) 治疗.
- 由于转录的相似性,区分面和尾部VM祖先是具有挑战性的,但只有尾部细胞产生功能性多巴胺基 (DA) 神经元用于PD治疗.
- 需要可靠的测试来控制VM衍生DA细胞的临床制造质量.
研究的目的:
- 为了识别新型分泌的生物标志物,以区分尾部VM多巴胺基原始细胞.
- 开发一种非侵入性质量控制试验,用于VM衍生DA细胞的临床制造.
主要方法:
- 枪炮蛋白质组学是在从面向和尾部VM前代细胞的细胞培养超体上进行的.
- 通过定量逆转录PCR (qRT-PCR) 和酶相关免疫吸收试验 (ELISA) 验证了关键蛋白质组合.
- 此外,ELISA标记器在良好的制造实践 (GMP) 制造的尾部VM批次上得到了验证.
主要成果:
- 在尾部VM祖先中丰富的新型分泌标记物 (CPE,LGI1,PDGFC) 被识别和验证.
- 这些尾巴标记与EN1表达相关,这是成功DA细胞移植结果的预测指标.
- 标记物CNTN2和CORIN被丰富在非多巴胺基的面面VM培养物中.
- 关键的ELISA标记被验证在GMP制造的尾部VM超样本上.
结论:
- 分泌的标记物LGI1和CORIN可以区分面向和尾部VM祖先.
- 建议使用双ELISA面板测量LGI1/CORIN比率在第16天作为一种非侵入性的工艺质量控制测试.
- 这种测试可以预测用于临床制造的尾部VM DA细胞的正确模式批量.
