在基于光学组织清除的瘤微环境的3D免疫光显微镜中,通过LED光漂白增加了多重性

科学领域:

• 生物医学成像技术 生物医学成像技术
• 癌症研究 癌症研究
• 免疫组织化学 免疫组织化学

背景情况:

• 光学组织清除和3D免疫光 (IF) 显微镜对于研究瘤微环境 (TME) 是至关重要的.
• 目前的3D IF显微镜方法具有有限的多重复合能力,将分析限制在少数TME组件上.
• 需要先进的技术来增加清除组织的3D成像的多重性.

研究的目的:

• 开发和验证一种新的LED光漂白方法,用于增强3D免疫光显微镜中的多重性.
• 为了实现瘤微环境 (TME) 的全面3D空间映射,提高分辨率和细节.
• 促进TME细胞重塑的定量分析,特别是对免疫疗法等疗法的反应.

主要方法:

• 开发了一种高功率的LED光漂白装置和一个温度控制的腔室,以便在不损害组织或蛋白质抗原的情况下有效地消除信号.
• 建立一个循环工作流程,包括免疫光染色,组织清除,3D共聚焦显微镜和LED光漂白.
• 实施组织安装和区域跟踪方法,以在多个周期中准确地记录图像.

主要成果:

• 成功实施了使用循环光漂白工作流程对400微米厚的瘤宏切割进行8倍成像的能力.
• 在相同的瘤组织中可视化各种血管,免疫和癌细胞,以3D的全组织和细胞分辨率.
• 验证了TME细胞改造后免疫疗法的定量3D空间分析方法.

结论:

• 开发的LED光漂白系统和工作流程显著增加了3DIF显微镜的复杂化能力.
• 这种新的方法为瘤异质性和治疗反应提供了前所未有的见解,通过使TME的详细3D绘图成为可能.
• 该技术为推进癌症研究和理解复杂的生物系统提供了一个强大的新工具.