在ESI-MS中,氨基酸添加剂在电热充电期间对蛋白质稳定性的影响
Roshan Javanshad1, Rajendra Panth1, Andre R Venter1
1Department of Chemistry, Western Michigan University, Kalamazoo, Michigan 49008-5413, United States.
Journal of the American Society for Mass Spectrometry
|December 11, 2023
概括
电热超充电 (ETS) 产生具有高电荷的蛋白质离子. 稳定试剂,如林和伊米达减少蛋白质在ETS期间的展开和超级充电,挑战以前的假设.
科学领域:
- 质谱测量质量谱测量
- 蛋白质化学 蛋白质化学
- 分析化学 分析化学
背景情况:
- 电热超充电 (ETS) 在电喷射电离中产生高电荷的蛋白质离子.
- 假设ETS涉及高温和高电压下二碳酸盐的蛋白质不稳定.
- 排放交易体系的确切机制仍然不完全理解.
研究的目的:
- 为了研究电热超充电 (ETS) 的机制.
- 在ETS条件下评估添加剂在调节蛋白质充电中的作用.
- 测试有关ETS中蛋白质不稳定和热展开的假设.
主要方法:
- 研究了各种添加剂对ETS期间蛋白质电荷状态分布的影响.
- 原生和未折叠的蛋白质包裹的强度比.
- 分析了观察到的最低和最高电荷状态的变化.
- 使用了雾化微电子喷雾电离.
主要成果:
- 源温度显著影响ETS比喷雾电压更多.
- 林和甘氨酸减少了蛋白质的超级充电.
- 伊米达证明了对ETS的最高非共价复合稳定性.
- 添加效应与已知的溶液中蛋白质稳定/不稳定相一致.
结论:
- 添加诸如proline和imidazole之类的稳定试剂可以减轻氨基二碳酸盐溶液中的蛋白质展开和超级充电.
- 研究结果提供了证据,证明电荷耗尽和热展开不是ETS的主要机制.
- 由于稳定添加剂的作用,ETS机制需要进一步阐明.
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