低于5分钟的RP-UHPLC-TIMS用于高通量非定位脂组学及其对多个矩阵的应用
Fabrizio Merciai1, Manuela Giovanna Basilicata1, Danila La Gioia1,2
1Department of Pharmacy, University of Salerno, Via Giovanni Paolo II, 13284084, Fisciano, SA, Italy.
Analytical and bioanalytical chemistry
|December 11, 2023
概括
高通量4D捕获离子移动性质谱 (HT-4D-TIMS) 能够实现快速,准确的非目标脂管学. 这种方法将复杂的生物样本的分析时间减半,有助于疾病和药物发现研究.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 分析化学 分析化学
- 质谱测量质量谱测量
背景情况:
- 非向性脂质组学对于理解疾病和药物研究中的脂质变化至关重要.
- 传统的UHPLC-HRMS方法用于非向性脂组学,其产量较低,限制了大规模查.
- 在脂管学中需要更快,高通量方法.
研究的目的:
- 评估一个5分钟以下的高通量四维被困离子移动性质谱 (HT-4D-TIMS) 平台用于快速脂质分析的应用.
- 评估平台在分析复杂生物矩阵方面的表现.
- 确定HT-4D-TIMS是否可以在不影响脂质识别和量化的情况下提高吞吐量.
主要方法:
- 使用了一个5分钟以下的高通量四维被困离子移动性质谱 (HT-4D-TIMS) 平台.
- 采用快速的4分钟逆相 (RP) 梯度进行分析.
- 在复杂的生物矩阵上测试该平台,包括人类AC-16细胞和小鼠组织 (大脑,肝脏,,便).
主要成果:
- 该HT-4D-TIMS平台成功地分化了凝聚性异构和异构脂质,防止了共同碎片化.
- 在58个脂类子类中注释了1910个不同的脂类物种 (1308个在分子层面,602个在总成分层面).
- 实现了高量化精度 (CV% = 0.39%),可与较长的LC梯度相比较,并将分析时间缩短了一半.
- 已证明能够快速准确地分析复杂的生物矩阵.
结论:
- 基于HT-4D-TIMS的非向脂质组学提供了高覆盖率和精度.
- 该平台显著减少了分析时间,使其适合大规模选.
- 这种方法有助于在疾病模型和药物发现中快速评估脂质代谢变化.
